[发明专利]一种托桂型菊花花器性状关联分子标记筛选方法及应用

摘要

本发明属于生物技术领域，提供一种托桂型菊花花器特性QTL分子标记筛选方法，该种方法可用于托桂型菊花花器性状优良基因的定位和克隆及托桂型菊花新品种的培育。包括1、试验材料及其表型数据的获得；2、菊花连锁图谱构建；3、结合表型数据和分子遗传图谱，进行托桂型菊花花器性状的QTL分析；4、托桂型菊花花器性状关联分子标记的确定。本发明以托桂型秋菊品种‘QX‑053’为母本和非托桂型秋菊品种‘南农惊艳’为父本杂交获得的160株F1分离群体为试材，获得了多个与托桂型菊花花器性状显著关联的分子标记。托桂型菊花花器性状关联分子标记的获得，可用于托桂型菊花花器性状的优良基因的精细定位和克隆，大大提高选择效率，从而加快托桂型菊花育种进程。

主权项

一种托桂型菊花花器性状关联分子标记，其特征在于：该分子标记分别为：控制心花直径的CfdE1Q1‑1（CfdE2Q1），关联分子标记为SSR34‑255，分子量大小为255，扩增该标记的引物正向序列为34F：cctagtatcaaagctgcgaaca；反向序列为34R caatcgcgttatcgtgtacc；控制心花直径的另一个QTL:CfdE1Q2（CfdE2Q2），关联分子标记为M20E17‑88，分子量大小为88，扩增该标记的引物正向序列为M20：gagtatcaacccggatt；反向序列为E17：gactgcgtacgaattcca；控制管状花长的TflE1Q1（TflE2Q1），关联分子标记为SSR35‑77，分子量大小为77，扩增引物正向序列为35F：cggtatgaaccaggaagcat；反向序列为35R：atgcgtttcaaagtccatgt；控制管状花宽的TfwE1Q1‑1（TfwE2Q1），关联分子标记为SSR34‑255，分子量大小为255，扩增引物正向序列为34F：cctagtatcaaagctgcgaaca；反向序列为34F caatcgcgttatcgtgtacc；针对花径、舌状花数、舌状花宽、管状花数、最深齿裂长、花柱长的QTLs，分别是：控制花径的QTL:FldE1N5,关联分子标记为N‑M20E5‑150和N‑M20E5‑259，扩增引物正向序列为M20：gagtatcaacccggatt；反向序列为E5：gactgcgtacgaattaac；QTL:FldE2N3，关联分子标记为QN‑M20E17‑218和N‑M20E17‑596，扩增引物正向序列为M20：gagtatcaacccggatt；反向序列为E17： gactgcgtacgaattcca；控制舌状花数的QTL: RflE2N3‑1、RflE2N3‑2与RflE2N3‑3，关联分子标记为N‑M20E5‑150和N‑M20E5‑259，扩增引物正向序列为M20：gagtatcaacccggatt；反向序列为E5：gactgcgtacgaattaac；控制舌状花宽的QTL: RfwE2N10，关联分子标记为N‑M23E1‑181和N‑M25E5‑134；N‑M23E1‑181对应的扩增引物正向序列为M23：cacagtcatgccggaat；反向序列为E1：gactgcgtacgaattaat；N‑M25E5‑134对应的扩增引物正向序列为M25：caggactaaaccggata；反向序列为E5：gactgcgtacgaattaac；控制管状花数的QTL: TfnE2Q1，关联分子标记为QN‑SSR73‑338和QN‑SSR262‑342；QN‑SSR73‑338对应的扩增引物正向序列为73F：tgggtaaatgggtgttcatgt；反向序列为73R：gctgcactttctccctaacc；QN‑SSR262‑342对应的扩增引物正向序列为262F：atctgcctcctgatcctgaa；反向序列为262R：ttgaagatccatcaccgaca；最深齿裂长的QTL: LllE1N2，关联分子标记为N‑SSR109‑492和QN‑SSR55‑160；N‑SSR109‑492对应的扩增引物正向序列为109F：aggagccacatgacatagcc；反向序列为109R：ggagcttcgacccaattgta；QN‑SSR55‑160对应的扩增引物正向序列为55F：accgccactaccaaaacctc；反向序列为55R：tggtaaaggtggtggtgcag；另一个QTL: LllE2N5，关联分子标记为N‑M20E5‑139和N‑M20E5‑126，对应的扩增引物正向序列为M20：gagtatcaacccggatt；反向序列为E5：gactgcgtacgaattaac；控制花柱长的QTL:SllE1Q3，关联分子标记为QN‑M23E1‑209和QN‑M23E1‑233，扩增引物序正向序列为M23：cacagtcatgccggaat；反向序列为E1：gactgcgtacgaattaat。