[发明专利]利用人造血干细胞制备巨核细胞及血小板的方法和体系

摘要

本发明涉及利用人造血干细胞制备巨核细胞及血小板的方法和体系。本发明的技术方案可使得CD34⁺干细胞在保持原来干性特征的基础上进行有效和大量的扩增，并进一步采用定向分化的技术制备成熟的巨核细胞，用于生产血小板。本发明的技术方案可解决血小板用于疾病的移植治疗和科研的来源问题，可为国防提供血液成分细胞的战略储备。

主权项

1.一种制备人巨核细胞的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)利用造血干细胞扩增培养基扩增CD34⁺干细胞；(2)将步骤(1)扩增后的细胞转移到巨核细胞诱导分化培养基中培养，获得人巨核细胞；其中，所述的造血干细胞扩增培养基由干细胞基础培养基、按照体积比0.01‑0.1％DMSO以及如下组分组成：干细胞因子：50‑500ng/mL；Flt3‑配体：50‑500ng/mL；血小板因子TPO：5‑200ng/mL；白介素3：10‑250ng/mL；Sall样蛋白4B：1‑10ng/mL；和造血干细胞扩增剂StemRegenin‑1：0.5‑3μM；其中，所述的巨核细胞诱导分化培养基由干细胞基础培养基以及如下组分组成：干细胞因子：50‑500ng/mL；血小板因子TPO：5‑200ng/mL；白介素3：10‑250ng/mL；白介素6：5‑100ng/mL；白介素11：5‑100ng/mL；粒细胞巨噬细胞刺激因子：5‑50ng/mL；和低密度脂蛋白：5‑50μ g/mL。