[发明专利]从馆藏干制麻蝇标本中扩增DNA条码全长方法及试剂盒有效
申请号: | 201410364117.8 | 申请日: | 2014-07-28 |
公开(公告)号: | CN104651351B | 公开(公告)日: | 2017-12-12 |
发明(设计)人: | 胡佳;岳巧云;邱德义;陈健;刘德星;魏晓雅 | 申请(专利权)人: | 岳巧云 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 528403 广东省中山市东区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开一种从馆藏干制麻蝇标本中扩增DNA条形码全长的方法及试剂盒。该方法提供四条引物,分别为LCO1490、HCO1856、HCO2198和LCO1728;以馆藏干制麻蝇标本的基因组DNA为模板,通过LCO1490和HCO1856为引物对进行PCR,得到片段A,通过HCO2198和LCO1728为引物对进行PCR,得到片段B;将片段A和片段B拼接,得到馆藏干制麻蝇标本的DNA条形码全长。实现该方法的试剂盒包含引物LCO1490、HCO1856、HCO2198和LCO1728。本发明提供的方法准确、快速,其扩增结果与其他直接扩增全长相比,对麻蝇通用性好,扩增效率高,具有更大的可靠性和适应性。 | ||
搜索关键词: | 馆藏 干制麻蝇 标本 扩增 dna 条码 全长 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种从馆藏干制麻蝇标本中扩增DNA条形码全长的方法,其特征在于包含以下步骤:(1)设计PCR所需要引物,如下:LCO1728:5'‑TCCTCGAATAAATAATATAAGTTTT‑3';HCO1856:5'‑GATAAACAGTTCATCCTGTTCCAGC‑3';LCO1490:5'‑GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG‑3';HCO2198:5'‑TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA‑3';(2)提取馆藏干制麻蝇标本的基因组DNA;(3)扩增:①以步骤(2)得到的基因组DNA为模板,以LCO1490为上游引物,HCO1856为下游引物,进行PCR,得到片段A;②以步骤(2)得到的基因组DNA为模板,以LCO1728为上游引物,HCO2198为下游引物,进行PCR,得到片段B;(4)测序:将步骤(3)得到的片段A和片段B分别克隆到克隆载体上,测序;拼接,得到从馆藏干制麻蝇标本的DNA条形码全长。
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