[发明专利]一种从包涵体中制备可溶性白介素重组蛋白的方法及试剂有效
申请号: | 201410363398.5 | 申请日: | 2014-07-28 |
公开(公告)号: | CN104292325B | 公开(公告)日: | 2018-08-03 |
发明(设计)人: | 邹潮 | 申请(专利权)人: | 哈德逊(天津)生物技术有限责任公司 |
主分类号: | C07K14/54 | 分类号: | C07K14/54;C07K1/14 |
代理公司: | 天津滨海科纬知识产权代理有限公司 12211 | 代理人: | 王雨杰 |
地址: | 300308 天津市空港*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种从包涵体中制备可溶性白介素重组蛋白的方法及试剂,包括洗涤液、菌体裂解液、包涵体溶解液、蛋白复性液‑I和蛋白复性液‑II。使用本发明诉述的包涵体溶解液可以显著提高从包涵体中获得可溶性白介素重组蛋白的得率,从而解决用大肠杆菌表达体系生产白介素所存在的问题。与现有技术相比,本发明不含有任何蛋白变性剂,这样有利于后续的蛋白复性;操作简单,可提升可溶性白介素蛋白得率达90%以上,相对常规使用蛋白变性剂法只能获得5‑20%具有明显优势,具有推广应用的价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 包涵 制备 可溶性 白介素 重组 蛋白 方法 试剂 | ||
【主权项】:
1.一种从包涵体中制备可溶性白介素重组蛋白的试剂,其特征在于:包括洗涤液、菌体裂解液、包涵体溶解液、蛋白复性液‑I和蛋白复性液‑II,所述包涵体溶解液由pH值10‑12的Tris‑NaOH缓冲液、NaCl、Glycerol、EDTA、2‑巯基乙醇和N‑十二烷基肌氨酸钠组成。
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