[发明专利]一种从发酵液中提取纯化高分子聚γ‑谷氨酸的方法

摘要

本发明公开了一种从发酵液中提取纯化高分子聚γ‑谷氨酸的方法，属于化学技术领域，步骤1.发酵液中菌体的去除；步骤2.活性炭脱色；步骤3.发酵液中阴阳离子的去除顺序；步骤4.发酵液浓缩；步骤5.干燥。本发明建立了一套经济可行的预处理工艺，可有效实现γ‑PGA高黏发酵液的菌液分离、色素等杂质的去除，并进行超滤冻干，最终精制得到高纯度的γ‑PGA成品，为γ‑PGA的最终商品化提供了可行的工艺路线。

主权项

一种从发酵液中提取纯化高分子聚γ‑谷氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1.发酵液中菌体的去除所述发酵液为微生物发酵法合成γ‑PGA的发酵液；(1)发酵液预处理发酵结束后，将发酵液在40～100℃条件下处理10～60min，用蒸馏水稀释1～10倍；(2)硅藻土过滤除菌体将滤纸浸湿后，铺于抽滤漏斗的底部，使滤纸与漏斗底部紧紧相贴；将硅藻土与水的均匀混合液倒入铺好滤纸的漏斗内，待硅藻土沉淀后，开启真空泵进行真空抽滤，抽滤压力为0.1MPa；硅藻土形成1～2.5cm厚涂层且其表面水抽尽后，倒入预处理后的发酵液滤液有黏性后收集，在不换硅藻土滤层的情况下，连续过滤4次，1g硅藻土可以去除3.4mL原发酵液中的菌体；步骤2.活性炭脱色(1)发酵液中有色杂质吸光度的确定对用活性炭处理前后的γ‑PGA发酵液及购买的标准γ‑PGA分别在波长200nm～500nm下进行紫外光谱全波长扫描，确定γ‑PGA发酵液中色素杂质最大吸收波长，作为脱色处理的评价指标；经紫外扫描后，γ‑PGA发酵液中有色杂质的最大吸收波长为260nm；(2)发酵液中有色杂质的去除硅藻土除菌体后的发酵液，添加颗粒状活性炭，其中颗粒状活性炭与硅藻土除菌体后的发酵液的质量体积比为0.1～2.0％，以20～100rpm的速度搅拌5～60min；步骤3.发酵液中阴阳离子的去除顺序脱色后的发酵液先过阳离子交换树脂，后过阴离子交换树脂；步骤4.发酵液浓缩用0.1μm‑0.6μm孔径的中空纤维膜进行浓缩，浓缩液稀释至浓缩前液体体积的0.5～2倍，再进行浓缩，此浓缩‑稀释‑浓缩的过程重复1～4次，发酵液中的小分子物质，谷氨酸和葡萄糖残余量减少至0；步骤5.干燥将浓缩后的γ‑PGA发酵液分装于样品盘中，置于‑80℃冰箱内预冻6h后，在‑60℃下真空冷冻干燥，获得纯品γ‑PGA。