[发明专利]UPF0538蛋白多克隆抗体的获取方法无效
| 申请号： | 201410311523.8 | 申请日： | 2014-07-02 |
| 公开（公告）号： | CN104031931A | 公开（公告）日： | 2014-09-10 |
| 发明（设计）人： | 胡江江;戚武林;高亚军;张世馥;赵辅昆 | 申请（专利权）人： | 浙江理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K16/18;C07K16/06 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 310018 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种UPF0538蛋白多克隆抗体的获取方法，该方法通过设计的特异性引物，通过RT-PCR技术对UPF0538基因进行克隆测序，再进行原核表达载体pET-28a(+)-UPF0538的构建，然后进行了UPF0538原核表达；最后将UPF0538蛋白纯化到85%以上后进行UPF0538多克隆抗体的制备与纯化。本发明获得的产品效价高，特异性好，可以满足UPF0538蛋白的相关测定，弥补了UPF0538的多克隆抗体的研究空白，为研究UPF0538蛋白提供材料。 | ||
| 搜索关键词： | upf0538 蛋白 克隆 抗体 获取 方法 | ||
【主权项】：
UPF0538蛋白多克隆抗体的获取方法，其特征是，包括以下步骤：（1）设计的含有酶切位点引物；（2）利用设计的含有酶切位点引物将UPF0538基因进行PCR扩增，并通过酶切构建原核表达载体，从而获得原核表达载体pET‑28a(+)‑UPF0538；（3）再将原核表达载体pET‑28a(+)‑UPF0538转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)并用IPTG进行目的基因的诱导表达，获得UPF0538蛋白；将UPF0538蛋白纯化至85%以上；（4）将纯化后的UPF0538蛋白免疫到新西兰大白兔上，在最后一次免疫的一周后颈动脉取血，收集血清；血清纯化后，获得目的UPF0538多克隆抗体。
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