[发明专利]一种介孔材料表面蛋白质环冠的选择性酶解方法

摘要

本发明的目的在于提供一种介孔纳米粒子表面蛋白质环冠的选择性酶解方法。它省略了酶解前的蛋白质变性、还原及烷基化反应，减少了因蛋白质变性从介孔孔道内的流出，并利用介孔材料的排阻效应，通过将磁性固定化酶用于介孔材料表面蛋白质环冠的酶解和分析。该方法首次实现了介孔材料表面吸附的蛋白质环冠的选择性酶解和分析，在消除了介孔纳米材料孔道内吸附蛋白质的干扰的同时，达到了高效选择性酶解和分析介孔材料表面蛋白质环冠的目的，对于我们正确理解作为药物载体、基因载体等的介孔纳米材料在与生物体相互作用时在生物体内的分布、堆积及排出产生重要的影响及其对生物体产生的影响等具有非常重要的意义。

主权项

1.一种介孔纳米材料表面蛋白质环冠的选择性酶解方法，其特征在于：所述蛋白质环冠的选择性酶解是利用介孔材料的排阻效应、通过固定化酶在介孔材料表面进行的原位酶解；所述固定化酶为胰蛋白酶固载在尺寸大于50 nm且小于500 nm的包覆了二氧化硅层的磁性纳米材料上制成的；所述介孔材料的孔道特征为大于2nm且小于50nm；所述的固定化酶原位酶解介孔材料表面蛋白质环冠的方法在酶解时不需要使用变性剂尿素或盐酸胍对蛋白质进行变性以减少因蛋白质变性导致的孔道内部吸附蛋白质的流出；所述的固定化酶原位酶解介孔材料表面蛋白质环冠的方法在酶解时需要省略二硫苏糖醇（DTT）/碘代乙酰胺（IAA）的还原和烷基化反应，以减少因蛋白质结构破坏而引起的孔道内部吸附蛋白质的流出。