[发明专利]一种制备冬虫夏草多糖肽的方法

摘要

本发明涉及一种制备冬虫夏草多糖肽的方法，取以冬虫夏草纯粉为原料的水提取液，将其浓缩、离心、透析、截留而获得的含有高分子量多糖肽。用浓度为1％的冬虫夏草多糖肽溶液，缓慢滴加无水乙醇至1∶0.5(V/V)，离心，分级沉淀，干燥得第1级成分为冬虫夏草多糖肽1。取上清液再滴加无水乙醇至1︰1(V/V)同上处理，收集33～50％的沉淀，干燥得第2级成分为冬虫夏草2；将上清液继续再加乙醇至1︰1.5(V/V)，得第3级成分冬虫夏草3，取冬虫夏草3以1∶10比例加水微热溶解，通过多次柱分离，透析12～20h，取袋内液浓缩，沉淀，离心，收集沉淀部分，冷冻干燥，得冬虫夏草多糖肽。本发明自行制备冬虫夏草多糖肽对照品，可将其应用于该类产品的测定。

主权项

一种制备冬虫夏草多糖肽的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)取以冬虫夏草纯粉为原料的水提取液，将其浓缩、离心、透析、截留而获得的含有高分子量多糖肽；(2)取步骤(1)中浓度为1％的含有高分子量多糖肽的冬虫夏草多糖肽溶液，在不断搅拌中缓慢滴加无水乙醇至体积百分比为1∶0.5，置3℃～5℃温度下存放12‑20h，用10000‑12000rpm离心，用无水乙醇分级沉淀，收集33％乙醇沉淀部分，置冰箱真空干燥得第1级成分为冬虫夏草多糖肽1；(3)取(2)步骤中的冬虫夏草多糖肽1上清液再滴加无水乙醇至体积百分比为1︰1，用无水乙醇分级沉淀，收集33～50％的沉淀，置3℃～5℃温度下存放12‑20h，真空干燥后得第2级成分为冬虫夏草2；将冬虫夏草2上清液继续再加乙醇至体积百分比为1︰1.5，得第3级成分冬虫夏草3，置真空干燥得冬虫夏草多糖肽粗品；(4)取冬虫夏草多糖肽粗品以1∶10比例加水微热溶解，离心去杂，通过聚丙烯胺凝胶至少2次柱分离，用含50mol·L‑1NaCl的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液，透析12～20h，取袋内液浓缩，用三倍无水乙醇沉淀，离心，收集沉淀部分，在‑16℃～‑20℃温度下干燥，得浅褐色粉末状物质为冬虫夏草多糖肽。