[发明专利]胰岛分离方法及装置

摘要

本发明公开了一种胰岛分离方法及装置，所述方法包括如下步骤：胰腺的前处理；加消化液；注水；消化；检样；收集消化液；二次消化；离心；沉淀重悬。本发明涉及的胰岛分离方法，利用具有双层空心壁、且底部具有两层滤网的消化罐，通过其具有的双层空心壁中注入的恒定温度的水，保持消化灌内的温度恒定，使得胰腺的消化比较完全，且胰岛的得率较高，且成本低，操作简便。

主权项

一种胰岛分离方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)胰腺的前处理：选取具有双层空心壁的消化罐，且所述消化灌的底部具有两层滤网；往修整后的胰腺的胰管内灌注消化液后放入所述消化灌中，所述消化液为胶原酶消化液；(2)加消化液：向步骤(1)的消化灌中加入胶原酶消化液，并密封所述消化灌，所述胶原酶消化液的加入量为覆盖所述胰腺；(3)注水：注水至所述消化罐的双层空心壁中，所述水温为35～40℃，并保持温度的恒定；(4)消化：消化3‑10分钟后，开始晃动消化罐，继续消化10‑30分钟；(5)检样：取消化罐内的消化液，加入染色液，光学显微镜下观察胰岛，当游离胰岛≥60％时，停止消化，若未达到60％，则继续消化；(6)收集消化液：收集消化罐内的消化液，将收集的消化液放入HBSS和9‑11(V/V)％猪血清的混合物中保存于1‑10℃；(7)二次消化：重新加入胶原酶消化液至消化罐里，继续消化未消化完的胰腺，消化后收集消化液，并合并收集的消化液；(8)离心：将合并收集的消化液离心，收集沉淀，所得沉淀用HBSS液洗涤；(9)沉淀重悬：用HBSS和10％猪血清的混合物中重悬沉淀，梯度离心纯化胰岛，得到分离后的胰岛。