[发明专利]一种HyM土壤修复活性菌群的制备方法

摘要

本发明具体涉及一种HyM土壤修复活性菌群的制备方法。其能有效的提高土壤修复微生物的生产效率，且最大限度的保证其活性，提升了土壤修复微生物生产的规模化、工业化发展。一种HyM土壤修复活性菌群的制备方法为(1)将菌株CCTCC No.M204051进行常规斜面培养活化和种子培养，得种子培养液；(2)然后配制发酵培养基，并经灭菌后接种芽孢杆菌菌种和上述种子培养液，再用高速剪切机进行剪切，得到菌落；(3) 然后对菌落进行太阳能、外加热源发酵，得到菌泥；(4)对菌泥进行收集和干燥。

主权项

一种HyM土壤修复活性菌群的制备方法，其特征在于：所述的制备方法为：(1)将菌株CCTCC No.M204051进行常规斜面培养活化和种子培养，得种子培养液；(2)然后配制发酵培养基，并经灭菌后接种芽孢杆菌菌种和上述种子培养液，再用高速剪切机进行剪切，得到菌落；(3) 然后对菌落进行太阳能、外加热源发酵，得到菌泥；(4)对菌泥进行收集和干燥；所述的步骤（2）中的发酵培养基的配方为：酵母提取物5.0‑15.0 g/L、蛋白胨10.0‑30.0 g/L、氯化钠8.5‑9.0 g/L、葡萄糖20.0‑30.0 g/L、亚油酸8‑30 g/L、微量元素1‑1.5g/L、吐温80 1～5 g /L、腐殖酸5‑10 g /L、低聚糖5‑15 g /L、艾蒿2‑8 g /L、葛根2‑6 g /L、甘草2‑10 g /L、红豆杉叶2‑6 g /L、杜鹃2‑5 g /L、紫苏2‑4 g /L、腐殖酸3‑10 g /L、中蜂蜜3‑5 g /L、黄腐酸2‑5 g /L、食盐2‑10 g /L、胰蛋白胨2‑6 g /L、牛肉膏2‑6 g /L、酵素粉2‑5 g /L、氨基酸2‑12 g /L、意蜂蜜2‑6 g /L、红豆根块2‑6 g /L、其余为水；所述的步骤(3)的工艺流程中：a.接菌落微生物发酵液的种子液，接种量为发酵培养基溶液的体积比的5％～15％，种子液的光密度为1～3；b.发酵过程中，长菌温度为28℃～30℃，时间为60h～66h；c.采取慢速加糖方式，发酵液总体积10升，加糖量为100g‑350g，且在接种后6h开始，在48h内加完；d.上述发酵培养基中亚油酸不能直接加入，而经与分散剂混合后才能加入，且控制发酵液中亚油酸的浓度，采用缓慢加入的方式；e.发酵过程中采用添加氢氧化钠和盐酸自动平衡调节pH值，使pH值维持在6.0～6.6之间；所述的步骤（4）菌泥收集和干燥：发酵结束，发酵液通过高速冷冻离心机用去离子无菌水洗涤三次，洗涤时的转速为7000转/分，时间为20min，温度为4℃，离心收集细胞，加保护剂，真空冷冻干燥，即得HyM土壤修复活性菌群；所述的微量元素为无水醋酸钠或柠檬酸二铵；所述的保护剂为甘油、脱脂奶粉、海藻糖或甘露醇；所述的亚油酸的浓度为0.2 g/L；所述的分散剂为环糊精。