[发明专利]一种制备扇贝裙边活性肽的方法

摘要

本发明涉及一种制备扇贝裙边活性肽的方法，包括清洗匀浆、中性蛋白酶和碱性蛋白酶复合酶解、高温瞬时加热灭酶、脉冲电场纯化、超滤、混合床脱盐、色谱分离、真空浓缩、真空冷冻干燥和载物、压片步骤。本发明的有益效果为本方法通过对海洋贝类资源废弃物下脚料扇贝裙边的综合开发，变废为宝，可提高贝类产品的经济价值；通过本方法，扇贝裙边酶解效率显著提高、短肽获得率能够达到80%以上，操作简便，所得产品口感得到显著的改善，口服时生物活性能够得以保持。

主权项

一种制备扇贝裙边活性肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)匀浆：将经验收合格的扇贝裙边清洗后打浆，之后放入匀浆机进行匀浆；(2)复合酶解：先用中性蛋白酶对步骤(1)得到的原料进行水解，水解完成后再调节PH值用碱性蛋白酶水解；(3)灭酶：水解结束后，过滤，将滤液高温瞬时加热灭酶；(4)脉冲电场纯化：将步骤(3)得到的原料放入强脉冲电场中进行纯化；(5)超滤：将步骤(4)得到的原料进行超滤；(6)混合床脱盐：将步骤(5)得到的超滤酶解液进行混合床脱盐；(7)色谱分离：将步骤(6)得到的原料进行色谱分离纯化；(8)真空浓缩：将步骤(7)得到的色谱分离物在80～90℃下进行真空浓缩；(9)真空冷冻干燥：将步骤(8)得到的真空浓缩物进行真空冷冻干燥；(10)载物、压片：取经纯化、冷冻干燥后的壳聚糖和壳聚糖/明胶水凝胶，与步骤(9)得到的真空冷冻干燥物充分混匀，用压片机制成成品；所述步骤(1)中的匀浆操作后匀浆液颗粒粒度小于3um；所述步骤(2)中的中性蛋白酶为N120P、碱性蛋白酶为Alcalase；所述步骤(3)中的高温瞬时加热条件为95～100℃，加热时间2分钟；所述步骤(4)中的脉冲电场强度为5～15Kv/cm，脉冲频率为2500～3500Hz，处理时间为200～400us；所述步骤(5)中选用MWCO为1KD的超滤膜；所述步骤(6)中混合床脱盐技术条件为阴离子∶阳离子＝3∶2，过柱速度：5倍柱体积/小时，水解液pH值4.5；所述步骤(7)中色谱分离条件为：色谱柱，PhecdaC18柱；上样量：1mL；流速：4mL/min；检测波长：280nm和220nm；洗脱条件：0～3min，100％A；3～50min，0％～50％B；50～52min，50％～100％B；52～58分钟，100％B；58～60分钟，100％B～100％A，所述A为5％乙腈和0.05％三氟乙酸，所述B为80％乙腈和0.05％三氟乙酸；所述步骤(9)中真空冷冻干燥温度为‑30℃。