[发明专利]一种龙虎人丹植物药中的14种不挥发性成分的含量检测方法

摘要

本发明提供了一种利用液相色谱-LCQ离子阱质谱联用技术检测龙虎人丹植物药中14种不挥发性成分的含量的方法，该方法由以下步骤组成：首先配制供试品溶液和对照品溶液，再分别按下述方法进行检测：按进样量为1～20μL对Thermo BDS Hypersil C18色谱柱进样，控制柱温为20℃～40℃，接着用由A相和B相组成的流动相以0.2～1.5mL／min的速度按照规定的程序进行梯度洗脱，同时利用液相色谱-LCQ离子阱质谱联用技术检测洗脱液，获得供试品药物及对照品药物的离子色谱图，通过图谱对照检测各成分及其含量。其中所述流动相A相为纯水含0.005～0.015％甲酸(含0.2mM甲酸铵)，B相为乙腈。

主权项

一种龙虎人丹植物药中14种不挥发性成分含量的检测方法，该方法由以下步骤组成：(1)配制供试品溶液：取龙虎人丹植物药用溶剂配制成0.3～2mg／ml的供试品溶液；配制对照品溶液：精密称取对照品适量，置于10mL容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度。摇匀，得各对照品储备液，置于4℃冰箱保存。精密量取各储备液适量，用乙腈‑水(30∶70，v／v)稀释，得各对照品的混含标准溶液。按进样量为1～20μL对Thermo BDS Hypersil C18色谱柱进样，控制柱温为20℃～40℃，接着用由A相和B相组成的流动相以0.2～1.5mL／min的速度按照表1的程序进行梯度洗脱，同时利用液相色谱‑LCQ离子阱质谱联用技术检测洗脱液，获得供试品药物及对照品药物的离子色谱图；表1(2)所得对照品溶液的离子色谱图从左至右分别为儿茶素、表儿茶素、夏佛托苷、甘草苷、异甘草苷、甘草素、刺甘草查尔酮、甘草酸、异甘草素、胡椒碱、甘草查尔酮A、木香烃内酯、去氢木香内酯、甘草次酸，供试品的离子色谱图与对照品溶液的图谱比较，相应成分的保留时间相同的峰即是与该成分相同物质的特征峰，14种成分分别按照回归方程1‑14的标准曲线计算含量：1、Y=‑58.7323+7969.49*X，2、Y=‑27.1152+9662.59*X，3、Y=21.5606+45664.2*X，4、Y=1412.54+17234.1*X，5、Y=148.628+31138.9*X，6、Y=506.994+26899*X，7、Y＝1355.87+103418*X，8、Y=‑3837.66+68406.2*X，9、Y=‑25.543+46162.5*X，10、Y=‑67.6756+806193*X，11、Y=2756.77+191952*X，12、Y=‑57.0924+5792.34*X，13、Y=‑39.382+2253.51*X，14、Y=‑2462.4+112672*X；上述步骤中，配制供试品溶液或对照品溶液所用的溶剂为20～40％的乙腈，或者是与之流动性相似的溶剂；所述流动相A相为纯水含0.005～0.015％甲酸(含0.2mM甲酸铵)；B相为乙腈；实验中质谱条件为：LCQ离子阱质谱，离子源为ESI，离子喷雾电压5000V(+)、4500V(‑)，鞘气压30psi，辅助气压5psi，毛细管电压26V(+)、‑37V(‑)，毛细管温度300℃。扫描方式为全扫描模式。