[发明专利]一种便于形态学观察的粘孢子虫染色封存方法有效
申请号: | 201410055606.5 | 申请日: | 2014-02-19 |
公开(公告)号: | CN103808550A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
发明(设计)人: | 陆宏达;毛毛;竹攸汀;李振伟;卢俊;余伟楠;柴下 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N21/00 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 201306 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种便于形态学观察的粘孢子虫染色封存方法,包括制作粘孢子虫悬浮液、制作蛋白甘油粘性玻片、烘片、染色、脱色洗片以及脱水封片步骤。本发明的方法整个流程制作一般不超过2小时,如果使用染色架和染缸进行,还可以实现批量制作。染色效果好,在40倍物镜下,粘孢子虫孢质被染成深蓝色、极囊被染成浅紫红色、壳片不着色,这样极囊、孢质和壳片界线分明,孢子的形态结构一目了然;100倍油镜下,极囊极丝着色较深,极囊其它部分着色较浅,极丝清晰可见,制好的玻片可以重复观察使用,且能常年保存。 | ||
搜索关键词: | 一种 便于 形态学 观察 孢子 染色 封存 方法 | ||
【主权项】:
一种便于形态学观察的粘孢子虫染色封存方法,其特征在于包括如下步骤:(1)粘孢子虫悬浮液制作:从保存于福尔马林中的患粘孢子虫病病鱼上取出孢囊放入适量蒸馏水中,弄破孢囊使得粘孢子虫分散悬浮于蒸馏水中,粘孢子虫悬浮液中的孢子虫尽可能有较高浓度,一般以0.01~1×106/ml为最宜;(2)甘油蛋白粘性玻片制作:用大头针取芝麻大小的甘油蛋白均匀涂在载玻片上,用滴管滴2~3滴粘孢子虫悬浮液于甘油蛋白粘性玻片上,摇晃玻片使粘孢子虫悬浮液均匀地分布于玻片上;(3)烘片:把带有粘孢子虫的玻片在38~42℃干燥箱里烘干,以玻片上液体刚蒸发完为止;或者可以自然条件下晾干;(4)染色:用滴管吸取瑞氏‑姬姆萨A液(常规血细胞染色用瑞氏染液和姬姆萨1:1混合液)0.5~0.8ml覆盖于带有粘孢子虫的烘干玻片上,染色5~8min;再将瑞氏‑姬姆萨B液(pH=6.4~6.8的磷酸盐缓冲液)滴加于A液上,滴加量是A液的3倍,以嘴或洗耳球吹出微风使得液面产生涟漪状而充分混合,染色8~10min;用蒸馏水缓慢细流冲掉玻片上多余的染料,直到流下的蒸馏水变为无色为止;(5)脱色洗片:把染好的玻片浸入甲醇溶液中脱色洗片1~3min;(6)脱水及封片:脱色的洗片依次经过70%、80%、95%、100%梯度酒精分别脱水2min,然后分别经二甲苯纯酒精1:1混合液和二甲苯2min后用中性树胶封片。
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- 本实用新型公开了一种染片架,解决现有技术染液污染实验台、染液反流等问题,属于实验设备技术领域。本实用新型提供的染片架,包括:支撑框,其内欠装带有网孔的支撑板,所述支撑板上方立有限位板,所述限位板沿支撑框的长边设置;支撑臂,其安装于所述支撑框的两侧,并能够在水平方向上实现伸缩。本实用新型提供的染片架,通过支撑臂直接置于实验台的水槽上,冲洗过程中染液直接流下,染片效果更佳,清洁不污染实验台面,操作方便,提高工作效率,降低实验成本,适用范围广,实用性好。
- 一种真菌荧光染色液的制备及其应用-201910420531.9
- 张天明;谭建雄;付东山;罗群 - 江苏西宏生物医药有限公司
- 2019-05-20 - 2019-08-16 - G01N1/30
- 本发明公开了一种真菌荧光染色液的制备及其应用。所述真菌荧光染色液由荧光增白剂31、二甲亚砜、聚乙二醇、氢氧化钾、氯化钠、刚果红以及纯化水组成。本发明还公开了所述真菌荧光染色液的应用。所述真菌荧光染色液相较于其他产品具有着可操作性更好、检测灵敏度高以及视野更清晰等优点,具有良好的临床应用前景。
- 一种大脑组织冰冻切片的甲苯胺蓝快速染色方法-201910486181.6
- 谢朝晖;张程;王莲哲;王艳红;陈东莹 - 河南城建学院
- 2019-06-05 - 2019-08-16 - G01N1/30
- 本发明涉及一种大脑组织冰冻切片的甲苯胺蓝快速染色方法,将处理后的实验动物大脑组织适当修整,以需要的方向摆放至样品托上,利用锡纸将组织包埋成圆柱体,滴入OTC包埋胶,于‑80冰箱快速冷冻;取出冷冻好的组织切片后立即放入AF固定液中固定;水洗:将固定后的冰冻切片放入蒸馏水中洗5~7s;甲苯胺蓝染色:将水洗后的冰冻切片放入预热至50~60的甲苯胺蓝溶液中染色;水洗:将染色后的切片放入蒸馏水中,水洗8~14s,至洗去浮色为止;脱水:切片放入80%酒精脱水1min;分色:将脱水后的切片放入95%的酒精中分色20~30s;脱水:将分色后的切片迅速放入无水酒精中脱水10到20s;透明与封片:将切片放入二甲苯酒精混合液中3~8s后放入纯二甲苯中5~10s后封片。
- 一种高寒区野生老芒麦染色体制片方法-201910526616.5
- 祁娟;师尚礼;焦婷;刘黎;陈建纲;方强恩;刘欢;刘艳君;吴召林;金鑫 - 甘肃农业大学
- 2019-06-18 - 2019-08-16 - G01N1/30
- 本发明公开了一种高寒区野生老芒麦染色体制片方法,涉及农业技术领域。本发明方法包括:(1)准备根尖材料;(2)对所述材料进行预处理;(3)对预处理过的材料进行固定、保存,固定时间为18‑24h;(4)对固定后的材料进行解离,室温下解离时间为50‑80min,60℃恒温水浴下解离时间为8‑18min;(5)对解离后的材料进行媒染及染色,染色时间为2‑10h;(6)对染色后的材料进行软化,软化时间为30‑60min;(7)对软化后的材料进行压片;(8)对压片样品进行镜检。本发明方法操作简单方便,使获得的染色体分散均匀,背景浅,易于观察,得出的染色体数目准确度高。
- 一种纳米级颗粒物过饱和增长装置及控制方法-201611229980.8
- 张礁石;刘建国;桂华侨;余同柱;杨义新;杜朋;王文誉;赵欣;王杰;程寅;陆亦怀;刘文清 - 中国科学院合肥物质科学研究院
- 2016-12-27 - 2019-08-09 - G01N1/30
- 本发明涉及一种纳米级颗粒物过饱和增长装置及控制方法。该装置包括颗粒物样气通道、鞘气通道、饱和水蒸气通道、去离子水通道、气流比例控制装置和温度梯度控制装置。本发明是基于水蒸气凝结原理,将洁净鞘气包裹的带有大气颗粒物的样气通过饱和水蒸气通道,利用半导体制冷器和柔性加热器控制两级饱和水蒸气通道的温度,产生温度梯度,利用水蒸气扩散速率高于气体传热速率的特性使颗粒物周围的水蒸气过饱和,使得水蒸气凝结在颗粒物表面,促进颗粒物粒径增长。通过控制样气和鞘气的流量比例,或控制两级饱和水蒸气通道的温度差,来调节水蒸气过饱和度,实现对过饱和增长后的颗粒物粒径大小的动态控制。
- 一种易洗脱生物组织包埋剂的制备方法-201810358483.0
- 吴礼高 - 吴礼高
- 2018-04-20 - 2019-08-06 - G01N1/30
- 本发明公开一种易洗脱生物组织包埋剂的制备方法,包括以下操作步骤:(1)将甲基丙烯酸异丙酯、1,3‑二乙烯基四甲基二硅氧烷、甲基丙烯酸混合搅拌均匀后,向其中加入引发剂,混合搅拌均匀后,加热后,继续反应,制得聚合乳液;(2)向聚合乳液中加入有机硅羟基硅油乳液,混合搅拌均匀,将混合物继续加热后,保温反应,制得混合乳液;(3)向混合乳液中加入去离子水,持续搅拌后,制得易洗脱生物组织包埋剂。本发明制得的易洗脱生物组织包埋剂,成本低廉,绿色环保,稳定性强,对切片浸润固定效果显著,可显著的提升切片的质量,尤其是其在融化后,易洗脱,几乎无残留,不会对后续的诊断工作造成不利的影响。
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