[发明专利]包括胃泌酸调节素和免疫球蛋白片段的蛋白质缀合物的液体制剂

摘要

本发明涉及包括长期胃泌酸调节素缀合物的不含白蛋白的液体制剂，其中胃泌酸调节素肽，包括胃泌酸调节素的衍生物、变体、前体或片段，连接至免疫球蛋白Fc区，与天然胃泌酸调节素相比，该免疫球蛋白Fc区可增加长期胃泌酸调节素缀合物的生理活性的持续时间和长期保持其体内稳定性；以及制备液体制剂的方法。液体制剂包括缓冲剂、糖醇和非离子型表面活性剂，并且不包含人血清白蛋白和可能对人体有害的因子，因此不易受病毒感染。另外，本发明的胃泌酸调节素缀合物包括连接至免疫球蛋白Fc区的胃泌酸调节素，因与天然胃泌酸调节素相比此具有大分子量、延长的生理活性和良好的储存稳定性。 1

主权项

1.长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，包括：

药理活性量的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物，其中所述胃泌酸调节素衍生物缀合物包括

胃泌酸调节素衍生物，所述胃泌酸调节素衍生物是生理活性肽并且包括选自SEQ ID NOS:2‑34的氨基酸序列，以及

免疫球蛋白Fc区；和

不含白蛋白的稳定剂，其中所述稳定剂包含缓冲剂、糖醇和非离子型表面活性剂，

其中所述缓冲剂的pH范围为4.5至7.0。

2.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述稳定剂进一步包含选自等渗剂、糖、多元醇和氨基酸的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述非离子型表面活性剂防止所述长期胃泌酸调节素衍生物缀合物聚集。

4.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述免疫球蛋白Fc区是衍生自IgG、IgA、IgD、IgE或IgM的Fc区。

5.根据权利要求4所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述免疫球蛋白Fc区的各结构域是源自选自IgG，IgA，IgD，IgE和IgM的不同免疫球蛋白的结构域的杂合体。

6.根据权利要求4所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述免疫球蛋白Fc区是由单链免疫球蛋白组成的二聚体或多聚体，所述单链免疫球蛋白由相同来源的结构域组成。

7.根据权利要求4所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述免疫球蛋白Fc区是IgG4Fc区。

8.根据权利要求7所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述免疫球蛋白Fc区是人非糖基化IgG4Fc区。

9.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述缀合物利用非肽基聚合物或重组技术来制备。

10.根据权利要求9所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述非肽基聚合物选自聚丙二醇、乙二醇/丙二醇共聚物、聚氧乙烯多元醇、聚乙烯醇、多糖、葡聚糖、聚乙烯乙醚、可生物降解的聚合物，包括聚乳酸(PLA)和聚乳酸‑乙醇酸(PLGA)；脂质聚合物；几丁质；透明质酸；及其组合。

11.根据权利要求9所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述非肽基聚合物是聚乙二醇。

12.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述糖醇是选自甘露醇、山梨醇和甘油的一种或多种。

13.根据权利要求12所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述液体制剂中所述糖醇的的浓度为2‑15％(w/v)。

14.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述缓冲剂是选自柠檬酸盐、乙酸盐、组氨酸和磷酸盐缓冲剂的一种或多种。

15.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述胃泌酸调节素衍生物包括选自SEQ ID NO：24‑26的氨基酸序列。

16.根据权利要求2所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述等渗剂是氯化钠。

17.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述非离子型表面活性剂是聚山梨醇酯或泊洛沙姆。

18.根据权利要求17所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述液体制剂中所述非离子型表面活性剂的浓度为0.001‑0.1％(w/v)。

19.根据权利要求2所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述氨基酸是甲硫氨酸。

20.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述稳定剂包含pH范围为4.8至6.0的缓冲剂、选自甘露醇和山梨醇的一种或多种糖醇、和聚山梨醇酯20。

21.根据权利要求1所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，进一步包括选自间甲酚、苯酚和苄醇的一种或多种防腐剂。

22.根据权利要求21所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述液体制剂中所述防腐剂的浓度为0.001‑1％(w/v)。

23.根据权利要求21所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述防腐剂是间甲酚。

24.根据权利要求21所述的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，其中所述制剂用于多剂量给予。

25.长期胃泌酸调节素衍生物缀合物的液体制剂，包括：

药理学上有效量的长期胃泌酸调节素衍生物缀合物，其中所述胃泌酸调节素衍生物缀合物包括

胃泌酸调节素衍生物，所述胃泌酸调节素衍生物是生理活性肽并且包括选自SEQ ID NOS:2‑34的氨基酸序列，以及

免疫球蛋白Fc区；和

5‑50mM组氨酸；2‑15％(w/v)甘露醇；0.01‑1mg/mL甲硫氨酸；0.001‑0.1％(w/v)聚山梨醇酯20；和具有4.5至7.0范围内的pH的缓冲剂。

26.权利要求25所述的液体制剂，进一步包括0.001‑1％(w/v)间甲酚。

27.制备权利要求1、2、4至20和25中任一项所述的液体制剂的方法，所述方法包括步骤：

a)制备长期胃泌酸调节素衍生物缀合物，其中所述胃泌酸调节素衍生物缀合物包括

胃泌酸调节素衍生物，所述胃泌酸调节素衍生物是生理活性肽并且包括选自SEQ ID NOS:2‑34的氨基酸序列，和

免疫球蛋白Fc区；和

b)混合步骤a)中制备的所述长期胃泌酸调节素衍生物缀合物与稳定剂，所述稳定剂包含缓冲剂、糖醇和非离子型表面活性剂，其中所述缓冲剂的pH范围为4.5至7.0。

28.制备权利要求21至24和26中任一项所述的液体制剂的方法，所述方法包括步骤：

a)制备长期胃泌酸调节素衍生物缀合物，其中所述胃泌酸调节素衍生物缀合物包括

胃泌酸调节素衍生物，所述胃泌酸调节素衍生物是生理活性肽并且包括选自SEQ ID NOS:2‑34的氨基酸序列，和

免疫球蛋白Fc区；和

b)混合步骤a)中制备的所述长期胃泌酸调节素衍生物缀合物与稳定剂和防腐剂，所述稳定剂包含缓冲剂、糖醇和非离子型表面活性剂，

其中所述缓冲剂的pH范围为4.5至7.0。

29.权利要求27或28所述的方法，其中所述稳定剂进一步包含选自等渗剂、糖、多元醇和氨基酸的一种或多种。