[发明专利]用于任何聚合酶延伸活性的灵敏的,定量的聚合酶活性检测和用于确定活细胞的存在的方法在审
申请号: | 201380019842.5 | 申请日: | 2013-04-12 |
公开(公告)号: | CN104520438A | 公开(公告)日: | 2015-04-15 |
发明(设计)人: | 肖恩·马克·奥哈拉;丹尼尔·兹威特泽格 | 申请(专利权)人: | 宙斯科技公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京市百伦律师事务所 11433 | 代理人: | 周红力;陈少丽 |
地址: | 美国新泽*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 公开了一种新的,高度灵敏,定量以及快速的DPE-PCR分析方法,可用于例如存在纯化或选择的细胞类型的原核细胞,并且能够在低于10cfu细菌联合到珠裂解水平可重复的检测DNA聚合酶延伸活性。还公开了本发明的DPE-PCR分析方法用于普通检测微生物的可能性,通过测定包括革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌或念珠菌的微生物平板。进一步,公开了本发明的DPE-PCR分析方法可用于评估细菌细胞生存力,通过可重复的DNA聚合酶延伸活性与cfu指示的增殖之间的强烈相关度而提供。相信本发明公开的分析方法可作为有用的定量工具,广泛用于药学、环境,食品和临床事件的检测。 | ||
搜索关键词: | 用于 任何 聚合 延伸 活性 灵敏 定量 检测 确定 细胞 存在 方法 | ||
【主权项】:
一种检测样本中聚合酶活性的方法,作为包含活性聚合酶的活细胞或者亚细胞器存在的指标,该方法包括如下步骤:(a)将样本中作为聚合酶活性底物的核酸分子与样本接触;(b)在适合聚合酶活性的条件下孵育接触的样本;和(c)根据活化的聚合酶与底物核酸分子的作用结果确定核酸分子的存在(和/或定量),从而指示样本中活细胞或亚细胞器或总聚合酶活性的存在。
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