[发明专利]一种催化碳-氟和碳-氯键形成的卤化酶无效
| 申请号： | 201310710496.7 | 申请日： | 2013-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN103695384A | 公开（公告）日： | 2014-04-02 |
| 发明（设计）人： | 瞿旭东;王娅娅;邓子新 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12P19/40 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 汪俊锋 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程技术领域，涉及通过基因重组技术获得具有催化C-F键和C-Cl键形成的卤化酶。以来源于巴西诺卡菌的卤化酶基因为原始基因，根据卤化酶基因在大肠杆菌体内表达的密码子偏好，进行优化，合成以大肠杆菌为表达宿主的优化卤化酶基因序列；将优化卤化酶基因序列重组到克隆载体pUC57simple，经NdeI和HindⅢ双酶切之后，连接到具有同样内切酶位点的表达载体pET28a(+)片段上，获得表达载体pWHU2401；将表达载体pWHU2401转化大肠杆菌感受态细胞，获得能够异源表达卤化酶的工程菌，放大发酵，纯化，从而获得卤化酶。本发明的卤化酶能够特异性合成5’-FDA，催化活性跟已知的卤化酶FlA活性相当。在加入L-氨基酸氧化酶时，该卤化酶也能催化形成5’-ClDA。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 催化 形成 卤化 | ||
【主权项】：
一种卤化酶基因，核苷酸序列如SEQ ID No 2所示。
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