[发明专利]一种获得PCR扩增片段的方法在审
申请号: | 201310674223.1 | 申请日: | 2013-12-02 |
公开(公告)号: | CN103667261A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 仲集华 | 申请(专利权)人: | 仲集华 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种获得PCR扩增片段的方法。步骤如下:首先将对象P CR加入模版DNA2ul以及秋水仙素溶液中,并将混合物摇匀;待其混合均匀后放置不高于60摄氏度的环境下进行变性,时间2分钟;然后对其进行链霉亲和素修饰;再将混合物放置下列环境下:90-95摄氏度,18秒,55-65摄氏度,半分钟,75摄氏度1分钟;在磁富集单重PCR的基础之上,对这四个位点进行磁富集多重PCR扩增。;四个位点的磁富集多重PCR的退火温度为34℃。本发明的有益效果是,可以有效避免蛋白氨基酸丢失,且稳定性好,表达量高,具有成本低,操作简单的优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 获得 pcr 扩增 片段 方法 | ||
【主权项】:
一种获得PCR扩增片段的方法,其特征在于,步骤如下:首先将对象PCR加入模版DNA2ul以及秋水仙素溶液中,并将混合物摇匀;待其混合均匀后放置不高于60摄氏度的环境下进行变性,时间2分钟;然后对其进行链霉亲和素修饰;再将混合物放置下列环境下:90‑95摄氏度,18秒,55‑65摄氏度,半分钟,75摄氏度1分钟;在磁富集单重PCR的基础之上,对这四个位点进行磁富集多重PCR扩增。
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