[发明专利]一种宫颈上皮内瘤变细胞的体外培养方法无效
| 申请号： | 201310637730.8 | 申请日： | 2013-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN103602630A | 公开（公告）日： | 2014-02-26 |
| 发明（设计）人： | 刘玉珍 | 申请（专利权）人： | 刘玉珍 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 261041 山东省潍坊市奎*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种宫颈上皮内瘤变细胞的体外培养方法，包括以下步骤：步骤一，取小块人宫颈瘤变组织；步骤二，用I型胶原酶消化分解后制成细胞悬液；步骤三，利用台盼蓝拒染法对细胞的活性进行判定；步骤四，将细胞悬液接种到低胎牛血清培养基且经鼠尾胶原包被的培养瓶中，等待细胞贴壁；步骤五，细胞贴壁后更换无血清培养基对宫颈上皮内瘤变细胞进行纯化，每周更换至少两次培养液，待细胞融合至80％～85％后传代；利用该方法培养出来的CIN细胞成活率高，纯度高，传代后细胞的形态与原代无明显改变，携带人乳头瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)；CIN细胞体外培养成功，为宫颈癌的治疗研究提供了技术保障。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 宫颈 上皮 内瘤变 细胞 体外 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种宫颈上皮内瘤变细胞的体外培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，取小块人宫颈瘤变组织，小部分进行HPV分型检测，部分进行培养；步骤二，用I型胶原酶消化分解后制成细胞悬液；步骤三，利用台盼蓝拒染法对细胞的活性进行判定；步骤四，将细胞悬液接种到低胎牛血清培养基且经鼠尾胶原包被的培养瓶中，等待细胞贴壁；步骤五，细胞贴壁后更换无血清培养基对宫颈上皮内瘤变细胞进行纯化，每周更换至少两次培养液，待细胞融合至80％～85％后传代；步骤六，通过免疫荧光检测对细胞进行鉴定，通过PCR对HPV进行分型检测。
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