[发明专利]一种水稻基因组DNA的提取方法在审
| 申请号： | 201310559435.5 | 申请日： | 2013-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN103555712A | 公开（公告）日： | 2014-02-05 |
| 发明（设计）人： | 梁卫红;李佳佳;楼晨;林群婷;杨丹丹;王俊杰;郝雨帆 | 申请（专利权）人： | 河南师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 453000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种水稻基因组DNA的提取方法，包括裂解、提取、离心分离、酶解以及沉淀等步骤。通过本发明的方法，能够简易有效的提取水稻大片段基因组DNA，与现有的技术相比，能简化操作步骤，减少离心次数和转速，减少所需试剂的数量，DNA的质量完全可以满足包括基因组文库构建、基因组序列扩增、Southern blot，TAIL-PCR等在内的常见后续实验的要求。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 水稻 基因组 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种水稻基因组DNA的提取方法，其特征在于包括如下步骤：(1)取新鲜水稻黄花苗材料液氮研磨，化冻前将粉末转移至预热至60‑70℃的CTAB缓冲液中，轻轻转动离心管，轻柔混匀，水浴保温1‑3h。(2)将裂解混合物从水浴取出，冷却至室温后，加入0.8‑1.2倍体积的氯仿／异戊醇，氯仿／异戊醇的体积比为20—30：1，轻轻颠倒混合成乳浊液；(3)室温4500‑5500rpm离心8‑15min，将上层水相转至新容器中，加1／1000‑2／100体积的RNase A溶液，轻柔颠倒混匀，36‑38℃保温20min‑40min；(4)加入0.6‑0.8倍体积的异丙醇，待有白色丝状物产生，收集白色丝状物；(5)将收集丝状DNA用60％‑80％乙醇洗涤2次；(6)将洗涤后的DNA在室温空气干燥。
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