[发明专利]一种无血清软骨细胞培养液

摘要

一种无血清软骨细胞培养液，是在基础培养液中添加外源添加物。基础培养液是DMEM培养液或F12培养液或DMEM培养液与F12培养液的混合培养液，外源添加物为非必需氨基酸，葡聚糖，维生素C，谷氨酰胺，丙酮酸钠，胰岛素或胰岛素样生长因子，转铁蛋白，生长激素，三碘甲状腺氨酸，氢化可的松，地塞米松，亚硒酸钠，β-巯基乙醇，脂类浓缩剂，孕酮，丁二胺，碱性成纤维生长因子，表皮生长因子，转化生长因子，骨形成蛋白，血小板衍生生长因子。该培养液不添加白蛋白，能避免使用血清造成的潜在隐患，提高软骨细胞分泌细胞外基质的能力，接近在含血清培养液中的生长增殖状态，对于低密度接种软骨细胞的去分化速率及基质分泌能力的提高，明显优于含血清培养液。

主权项

一种无血清软骨细胞培养液，是由基础培养液与外源添加物组成，其特征在于，基础培养液是指DMEM培养液或F12培养液或DMEM培养液与F12培养液按照体积比为1:1的混合培养液；外源添加物为：葡聚糖为5～20g/L，脂类浓缩剂为0.1~1mL/L，丙酮酸钠为50~100mg/L，三碘甲状腺氨酸为0.01～2μM，氢化可的松为0.05～5mg/L，地塞米松为0.1～10μg/L，亚硒酸钠为1～5μg/L，β‑巯基乙醇为25～50μM，维生素C为10～100mg/L，谷氨酰胺为50～500μg/mL，转铁蛋白为1～20 mg/L，胰岛素或胰岛素样生长因子为5～100μg/L，生长激素为10~200μg/L、孕酮为5~20nM，丁二胺为20~100μM，非必需氨基酸为1%，细胞生长因子添加成分为：碱性成纤维生长因子为5～50μg/L，表皮生长因子为0.5～25μg/L，转化生长因子为1～25μg/L，骨形成蛋白为1~10μg/L，血小板衍生生长因子为1～20μg/L。