[发明专利]一种辣椒花药直接获得植株的培养方法和培养基

摘要

本发明涉及一种辣椒花药直接获得植株的培养方法和培养基，属于植物细胞工程技术领域。所述培养方法包括：(1)、选取小孢子处于单核靠边期的花蕾；(2)、花蕾用70％酒精浸泡0.5～1分钟，12‰的氯化汞8～15分钟，无菌水冲洗3～5次，无菌滤纸吸干水分，得到单核靠边期的无菌花药；(3)、将单核靠边期的无菌花药漂浮于液体培养基中，黑暗震荡培养20～25天后转为光照震荡培养；(4)、光照震荡培养10～20天后，将形成的子叶型胚转至MSO固体培养基中培养，长成正常植株。本发明的培养方法具有以下优点：(1)、大大提高正常胚状体的诱导频率，显著提高正常植株的再生频率；(2)、操作过程简单，能够直接由自由散落于液体培养基的小孢子获得植株；(3)、适用于牛角椒、羊角椒、线椒、灯笼椒等多种类型的辣椒。

主权项

一种辣椒花药直接获得植株的培养方法，包括下述步骤：(1)、将单核靠边期的无菌花药漂浮于液体培养基中，黑暗震荡培养，20～25天后转为光照震荡培养；所述液体培养基的组成为：2500mg／L KNO3、1025mg／L NH4NO3、295mg／L CaCl2·2H2O、325mg／L MgSO4·7H2O、145mg／L KH2PO4、67mg／L(NH4)2SO4、75mg／L NaH2PO4·H2O、100mg／L Ca(NO3)2·4H2O、13mg／L KCl、13.9mg／L FeSO4·7H2O、18.65mg／L Na2·EDTA、0.695mg／L KI、3.15mg／L H3BO3、22.13mg／L MnSO4·H2O、3.625mg／L ZnSO4·7H2O、0.188mg／L Na2MoO4·2H2O、0.016mg／L CuSO4·5H2O、0.016mg／L CoCl2·6H2O、100mg／L肌醇、5mg／L烟酸、2mg／L甘氨酸、0.5mg/L盐酸硫氨素(维生素B1)、0.5mg／L盐酸吡哆醇(维生素B6)、0.5mg/L叶酸、0.05mg／L生物素、800mg／L谷氨酰胺、100mg／L丝氨酸、30mg／L谷胱甘肽(GSH)、0.1mg／L BA、0.1mg／L IAA、0.01mg／L NAA、0.1％活性炭和6％蔗糖；(2)、光照震荡培养10～20天后，将形成的子叶型胚转至MSO固体培养基中培养，长成正常植株。