[发明专利]用于野外采样提取植物基因组DNA、蛋白质的组织固定方法有效
| 申请号： | 201310378734.9 | 申请日： | 2013-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN103898091A | 公开（公告）日： | 2014-07-02 |
| 发明（设计）人： | 欧文军;罗秀芹;刘斌;李开绵 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C07K1/14 |
| 代理公司： | 海口翔翔专利事务有限公司 46001 | 代理人： | 刘清莲 |
| 地址： | 57173*** | 国省代码： | 海南;66 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于野外采样提取植物基因组DNA、蛋白质的组织固定方法。该方法将组织样品切割为截面不大于0.5cm2的条块放入组织固定剂浸泡后过夜保存，固定后的样品用移液枪去除大部分固定剂并加入少许混合的组织固定干粉然后转入4℃冰箱保存数月或-20℃冰箱长期保存。对野外作业中的植物组织进行简单快速处理后的植物组织，可用于DNA、蛋白质提取和后期实验。既方便了野外采集植物组织的作业流程，又大大节约了野外采集植物组织的劳动成本。本发明是利用组织固定剂进行植物种组织材料进行固定的方法，为科技工作者处理固定植物组织，特别是野外采摘植物样品提供了一种简单有效的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 野外 采样 提取 植物 基因组 dna 蛋白质 组织 固定 方法 | ||
【主权项】：
用于野外采样提取植物基因组DNA、蛋白质的组织固定方法，其特征在于包括以下步骤：（1）组织固定剂配制a、取500～550g(NH4)2SO4、2.5gTris碱、3.7g Na2EDTA，将上述三种成分混均，获得组织固定干粉；b、混均后的组织固定干粉加入700～800mL热开水充分搅拌溶化，3℃～4℃冷却成饱和溶液有沉淀析出，PH为7.0～7.4；获得组织固定剂；（2）植物组织样品处理a、将植物组织样品切割为截面不大于0.5cm2的植物组织样品条块；b、将植物组织样品条块放入保鲜袋，往保鲜袋装入5～10倍体积的组织固定剂，保鲜袋完全排除空气后扎紧，置阴凉处固定12～24小时；c、固定后的植物组织样品，用移液枪去除保鲜袋中3/5～4/5比例的组织固定剂液体，并加入1～5g组织固定干粉；d、然后转入4℃冰箱保存数月或‑20℃冰箱长期保存。
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