[发明专利]一种单核细胞增生李斯特菌LAMP可视化检测方法

摘要

本发明属于食源性病原菌分子检测技术领域，具体涉及一种基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因的LAMP可视化检测方法。反应体系包括针对靶基因prfA的4条特异性引物、LAMP检测的反应体系、显色溶剂和反应覆盖液。60℃温育50min，80℃5min后终止反应，电泳后阳性扩增产物为不同大小区带组成的阶梯式图谱。扩增产物中加入显色溶剂，肉眼观察结果，天蓝色为阳性，紫罗兰色为阴性。本发明特异性强，操作简单，结果易于观察，可用于基层单位对于临床样品中单核细胞增生李斯特菌的初步筛选和快速检测。

主权项

一种以prfA基因作为靶基因进行单核细胞增生李斯特菌的环介导等温扩增即LAMP检测的引物组合，其特征在于，所述引物组合的DNA序列如下所示：外引物prfA‑B3：AAGCTTCCCGTTAATCGA；外引物prfA‑F3：GGCTTTCGTTATAATGTCTGG；内引物prfA‑BIP：AACTACTGAGCAAAAATCTTACGCAGCTAGACTGTATGAAACTTGTT；内引物prfA‑FIP：TAGCCTGCTCGCTAATGACTTTATTGATACAGAAACATCGGTT。