[发明专利]感光前体细胞与视网膜组织体外共培养方法有效

专利信息
申请号: 201310338634.3 申请日: 2013-08-06
公开(公告)号: CN103409363A 公开(公告)日: 2013-11-27
发明(设计)人: 彭广华;阴正勤 申请(专利权)人: 中国人民解放军总医院
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071
代理公司: 河南科技通律师事务所 41123 代理人: 闫瑞霞
地址: 100853*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种感光前体细胞与视网膜组织体外共培养方法。旨在建立感光前体细胞与视网膜感光细胞变性视网膜组织的共培养体系。该方法包括如下步骤:制备胚眼来源的感光前体细胞层;制备变性视网膜神经细胞层;将所得变性视网膜神经细胞层放置在感光前体细胞层上;插入式细胞培养皿的下室制备视网膜色素上皮层;构建体外视网膜组织与细胞的共培养体系,放置37℃,5℅CO2培养箱中培养。利用本发明方法在体外可直接观察和检测宿主细胞和移植细胞的生物特性和细胞结构、移植细胞与宿主细胞之间突触联系、移植细胞与宿主细胞的染色质构象重建、跟踪移植胚眼来源的感光前体细胞的存活、增殖、分化和功能重建的轨迹。
搜索关键词: 感光 体细胞 视网膜 组织 体外 培养 方法
【主权项】:
一种感光前体细胞与视网膜组织体外共培养方法,包括如下步骤:(1)在插入式细胞培养皿的上室物质交换膜上制备胚眼来源的感光前体细胞层;(2)制备变性视网膜神经细胞层;(3)将上步所得变性视网膜神经细胞层的内层即内界膜朝上,变性残留的部分光感受器细胞层向下,放置在步骤(1)中所述的感光前体细胞层上;        (4)在所述插入式细胞培养皿的下室制备视网膜色素上皮层;(5)构建体外视网膜组织与细胞的共培养体系,在所述插入式细胞培养皿中添加体外共培养所需的培养液至变性视网膜神经细胞层上面4~8mm,放置37℃,5℅CO2培养箱,每48~60小时换一次培养液。
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