[发明专利]一种从微生物发酵液中制备透明质酸的方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种从微生物发酵液中制备透明质酸的方法。该透明质酸的制备方法包括：（1）将产透明质酸的微生物细胞进行培养，调发酵液的pH，过滤；（2）配制聚乙二醇/苹果酸钠双水相萃取体系溶液；（3）利用双水相萃取体系进行透明质酸的分离和纯化，得到含有透明质酸的苹果酸钠溶液；（4）超滤膜过滤浓缩，截留液真空干燥，制得透明质酸产品。本发明的双水相体系对生物活性物质具有保护作用，易于生产放大，特别适合透明质酸的分离纯化；本发明可以实现透明质酸生产的连续化、规模化，并且透明质酸制备工艺简便，萃取剂可循环使用，透明质酸的收率高、纯度高，生产成本较低。

主权项

一种从微生物发酵液中制备透明质酸的方法，以含有透明质酸的微生物发酵液为原料，其特征为，包括如下步骤：（1）调微生物发酵液的pH值为4.0‑4.5，静置，过滤，收集滤出液，调滤出液的pH值为6.0‑6.5，制得含有透明质酸的滤出液；（2）在20‑30℃下，配制苹果酸钠水溶液，并向苹果酸钠水溶液中添加聚乙二醇，在总体系中使苹果酸钠的质量百分比浓度为20‑30wt%、聚乙二醇的质量百分比浓度为20‑30wt%，混合均匀，制得聚乙二醇/苹果酸钠双水相体系溶液；（3）向含有透明质酸的滤出液中按等体积加入聚乙二醇/苹果酸钠双水相体系溶液，搅拌均匀，静置分相，制得聚乙二醇上相溶液和含有透明质酸的苹果酸钠下相溶液；（4）向苹果酸钠下相溶液中加入等体积去离子水，再加入聚乙二醇，使聚乙二醇在总体系中的质量浓度为10‑15wt%，调节溶液的pH值为6.0‑6.5，搅拌均匀，静置分相，制得聚乙二醇上相溶液和含有透明质酸的苹果酸钠下相溶液；（5）将苹果酸钠下相溶液采用超滤膜过滤浓缩，收集截留液，截留液经真空干燥后，制得透明质酸产品。