[发明专利]丁酰胆碱酯酶及其制备方法和其制得的快速检测农药残留试剂盒无效
| 申请号： | 201310299102.3 | 申请日： | 2013-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN103352032A | 公开（公告）日： | 2013-10-16 |
| 发明（设计）人： | 孙东磊;安玉兴;管楚雄;龚恒亮;陈立君;李继虎;黄志武 | 申请（专利权）人： | 广州甘蔗糖业研究所 |
| 主分类号： | C12N9/18 | 分类号： | C12N9/18;C12Q1/46 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 万志香;郭元杰 |
| 地址： | 510316 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种丁酰胆碱酯酶及其制备方法和其制得的快速检测农药残留的试剂盒，所述制备方法包括以下步骤：将牛血清去杂，匀浆，经缓冲液浸提，离心弃沉淀，即得粗酶液；将粗酶液经硫酸铵沉淀，离心，弃上清液，将沉淀复溶，透析，再经DEAE柱层析，收集洗脱液，透析，纯化后得酶液，冷冻干燥；所述试剂盒包括丁酰胆碱酯酶、底物、显色剂和磷酸缓冲液；所述磷酸盐缓冲盐的浓度为0.9-0.11mol/L，pH为7.5-8.5。本发明所述试剂盒采用半纯化的丁酰胆碱酯酶配合稳定剂，可显著增强丁酰胆碱酯酶的稳定性；所述丁酰胆碱酯酶，其是由牛血清中纯化得到的，其敏感度强，其制得的试剂盒灵敏度也强。 | ||
| 搜索关键词： | 胆碱酯酶 及其 制备 方法 快速 检测 农药 残留 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种丁酰胆碱酯酶的制备方法，包括以下步骤：（1）将牛血清去杂，匀浆，经磷酸缓冲液浸提，离心弃沉淀，即得粗酶液；（2）将粗酶液经硫酸铵沉淀，离心，弃上清液，将沉淀复溶，透析，再经DEAE柱层析，收集洗脱液，透析，纯化后得酶液，冷冻干燥，即得酶粉。
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