[发明专利]草分枝杆菌及其免疫增强剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种草分枝杆菌及其免疫增强剂的制备方法，所述草分枝杆菌是通过以下步骤培养得到的：采用斜面培养基活化草分枝杆菌；采用种子培养基培养上述活化菌种得到种子液；按照3-6%的接种量（v/v）将上述种子液接种到发酵培养基中，通气培养48-50h，得到发酵液；所述免疫增强剂是将草分枝杆菌发酵液灭活，离心收集菌体，用PBS清洗2-3次，计算离心得到的菌体干重，再与适量PBS、0.5-1%SDS混合均匀，进行高压均质破碎，离心超滤制备后制备得到的。本发明所提供的草分枝杆菌生产方法工艺简单，培养周期短，有效降低生产成本。本发明制备的免疫增强剂既可单独使用，也可与其他疫苗、药物配伍使用来提高机体免疫力，且无毒副作用。

主权项

一种草分枝杆菌的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）采用斜面培养基活化草分枝杆菌；（2）将活化的草分枝杆菌采用种子培养基进行种子培养，得到种子液；（3）按3‑6%的接种量（v/v）将上述种子液接种到发酵培养基中，通气培养48‑50h，得到草分枝杆菌发酵液；所述斜面培养基的配方为：大豆蛋白胨5‑10g/L，酵母膏3‑8g/L，葡萄糖2‑5g/L，硫酸镁0.4‑0.6g/L，磷酸氢二钾0.4‑0.6g/L，磷酸二氢钾0.4‑0.6g/L，氯化钙0.4‑0.6g/L，琼脂15‑20g/L，pH7.3‑7.5；所述种子培养基的配方为：大豆蛋白胨5‑10g/L，酵母膏5‑10g/L，葡萄糖5‑10g/L，硫酸镁0.4‑0.6g/L，磷酸二氢钾0.4‑0.6g/L，磷酸氢二钾0.4‑0.6g/L，氯化钙0.4‑0.6g/L，甘油1‑5g/L，pH7.3‑7.5；所述发酵培养基的配方为：大豆蛋白胨5‑10g/L，酵母膏5‑10g/L，葡萄糖5‑10g/L，硫酸镁0.4‑0.6g/L，磷酸二氢钾0.4‑0.6g/L，磷酸氢二钾0.4‑0.6g/L，氯化钙0.4‑0.6g/L，甘油5‑10g/L，pH7.3‑7.5。