[发明专利]FRET原理的5-羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法有效
| 申请号： | 201310263449.2 | 申请日： | 2013-06-27 |
| 公开（公告）号： | CN103305621A | 公开（公告）日： | 2013-09-18 |
| 发明（设计）人： | 周翔;王天露;洪婷婷;郭璞 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 张火春 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供一种FRET原理的5-羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法，包括如下步骤：先用高钌酸钾将DNA中的5-羟甲基胞嘧啶氧化成5醛基胞嘧啶；再用带荧光的BODIPY化合物与DNA中的5醛基胞嘧啶反应；最后加入阳离子荧光聚合物，通过荧光检测来定量DNA中5羟甲基胞嘧啶的含量。该检测方法具有简单快速，成本较低的优点。 | ||
| 搜索关键词： | fret 原理 甲基 胞嘧啶 荧光 检测 方法 | ||
【主权项】：
FRET原理的5‑羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）用高钌酸钾将DNA中的5羟甲基胞嘧啶氧化成5醛基胞嘧啶；（2）用带荧光的BODIPY化合物与DNA中的5醛基胞嘧啶反应：以回香胺为催化剂，在pH=5的醋酸铵缓冲溶液中带荧光的BODIPY化合物与含醛基的DNA在37℃条件下反应12h，用氯仿萃取产物；（3）加入阳离子荧光聚合物，通过荧光检测来定量DNA中5羟甲基胞嘧啶的含量：将阳离子荧光聚合物加入到步骤（2）中的产物中，震荡离心，以380nm为发射波长，通过检测荧光强度来定量5羟甲基胞嘧啶的含量。
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