[发明专利]一种高效表达生产内吗啡肽2的方法及其应用无效
| 申请号： | 201310244698.7 | 申请日： | 2013-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN103320472A | 公开（公告）日： | 2013-09-25 |
| 发明（设计）人： | 吴飞翔;俞卫锋;孙玉明 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C12N15/867;C12N15/869;C12N15/864;C12N15/85;A61K38/07;A61P25/04 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 赵青 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物基因技术领域，目前未见利用人源性的神经生长因子前导肽实现对内吗啡肽-2的高效分泌的相关文献报道。本发明提供了一种高效表达生产内吗啡肽2的方法，包括：设计一个含有人源神经生长因子信号肽序列和内吗啡肽2表达序列的融合基因；然后将其插入表达载体，再转化宿主细胞，筛选并鉴定阳性重组子，诱导培养并外分泌表达蛋白，最后经纯化收集产物。本方法制备所得表达产物内吗啡肽2在制备治疗慢性疼痛及癌痛药物中的应用。由于该产物是内源性阿片肽，不存在成瘾、耐受等反应，而且在体内可长期表达，达到长时间治疗疼痛的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 表达 生产 吗啡 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种高效表达生产内吗啡肽2的方法，其具体步骤为：(a)设计并合成一个含有人源神经生长因子信号肽序列和内吗啡肽2表达序列的融合基因，该融合基因的序列如SEQ ID NO:1所示；(b)将(a)所述的融合基因序列插入一表达载体，使该融合基因序列处于表达载体启动子的控制之下，通过PCR扩增，筛选出阳性重组子，构建表达载体；(c)将(b)所构建的表达载体转化宿主细胞，诱导培养内吗啡肽2的外分泌表达；(d)收集表达产物内吗啡肽2，并采用硅胶柱层析法纯化内吗啡肽2。
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