[发明专利]一种新型枯草杆菌表达系统及产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌

摘要

本发明涉及一种新型枯草杆菌表达系统及产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌。一种新型枯草杆菌表达系统，包括基因工程菌株BS-T710与表达载体pBT-23a。一株产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌BS-T710-gadB，是将来基因gadB插入至所述的表达载体pBT-23a，获得重组表达载体pBT-23a-gad，利用化学转化法，将pBT-23a-gad转化入所述的基因工程菌株BS-T710，获得所述的产重组谷氨酸脱羧酶的基因工程菌BS-T710-gadB。该系统可用于高效表达外源基因，并且只需使用一种诱导物。重组工程菌BS‐T710‐gadB细胞，能够将MSG高效地转化为γ‐GABA。

主权项

一种新型枯草杆菌表达系统，其特征在于包括基因工程菌株BS‑T710与表达载体pBT‑23a，所述的表达载体pBT‑23a是将T7启动子基因插入枯草杆菌表达载体pHT43的KpnI/XbaI酶切位点间所得；所述的基因工程菌株BS‑T710通过如下方法构建：（1）将Pgrac基因，T7RNA聚合酶基因T7plo，及枯草杆菌色氨酸终止子Ter融合，构成T7pol的完整表达元件，并将T7pol的完整表达元件插入到枯草杆菌整合载体pDG1730的EcoRI酶切位点，得到T7RNA聚合酶整合表达载体pDG1730‑T7pol；（2）将T7RNA聚合酶整合表达载体pDG1730‑T7pol转化入枯草杆菌168菌株得到基因工程菌株BS‑T710。