[发明专利]一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法

摘要

一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，将复原羊乳离心脱脂，得到脱脂乳，并用等电点沉淀法制备酪蛋白，将酪蛋白沉淀进行冷冻干燥，将得到的酪蛋白冻干粉进行溶解制成酪蛋白溶液，通过加入不同种类的酶进行水解，对水解条件进行优化后，用超声波对水解过程进行处理，提高了其催化活力，使水解反应进行更彻底，得到的小分子ACE抑制肽能够对高血压患者产生显著的降压作用，并且对正常的血压无影响，具有无毒副作用、安全性高、易吸收的特点。

主权项

一种酶解羊乳酪蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：将羊奶粉与水按照质量比例1:9进行混合溶解，将得到的复原羊乳冷却到4℃，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，除去脂肪，得到脱脂乳；步骤2：将所得脱脂乳在35‑75℃范围内的恒温水浴箱中进行保温，采用磁力加热搅拌器进行搅拌，搅拌速度为0‑1600rpm，边搅拌边滴加HCl溶液，使脱脂乳溶液的PH达到4.2‑5.0，使酪蛋白进行沉淀，使用高速离心机在6400rpm下离心15min后，弃去上清液，将沉淀的酪蛋白进行冷冻干燥，在温度为‑40℃预冻12‑24h，再转移到冷冻干燥机在‑55℃下冷冻干燥24h，得到酪蛋白冻干粉，测定酪蛋白最大得率及条件；步骤3：将上述步骤所得酪蛋白冻干粉制成质量浓度为10%的酪蛋白溶液100ml，分别用蛋白酶K、胃蛋白酶、中性蛋白酶、Alcalase、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶6种蛋白酶进行水解反应1‑8h，酶与酪蛋白溶液的质量比为1：10，用恒温水浴箱及1mol/l NaOH溶液分别调整酪蛋白溶液的温度和PH,测试不同种类的酶较优的水解条件及在该条件下达到的ACE抑制率，每间隔1h将5ml水解液在90℃水浴中保持10min使酶失活，使用高速离心机在9000rpm的条件下离心20min， 除去未水解的酪蛋白，收集上清液并采用紫外分光光度法测定ACE抑制率；步骤4：在确定酶的种类及其较优水解条件的基础上，以ACE抑制率为指标，对水解过程进行优化，确定出该种类酶最佳的水解温度、PH、水解时间、酶与酪蛋白溶液的质量比；步骤5：在确定最佳水解条件的基础上，检测在不同超声功率（0、90、180、225w）条件下对水解反应的影响。