[发明专利]一种诱导型shRNA慢病毒表达载体及其构建方法与应用

摘要

本发明提供一种诱导型shRNA慢病毒表达载体及其构建方法与应用。所述诱导型shRNA慢病毒表达载体包含shRNA表达框和四环素阻遏蛋白表达框；shRNA表达框包含第一启动子、能与四环素阻遏蛋白结合的四环素应答元件、TATA盒和shRNA编码序列；四环素阻遏蛋白表达框包含第二启动子、四环素阻遏蛋白表达基因、内部核糖体进入位点(IRES)DNA序列和标记基因。与现有的诱导型shRNA表达载体相比，本发明的表达载体的优点包括：用单个载体即可迅速地在多种细胞株里建立诱导性shRNA表达来沉默基因；不需要细胞的克隆选择；可在细胞的体外培养和体内研究中使用。

主权项

一种诱导型shRNA慢病毒表达载体，包含：a) shRNA表达框；所述shRNA表达框包含第一启动子、能与四环素阻遏蛋白结合的四环素应答元件TRE、TATA盒和shRNA编码序列；b) 四环素阻遏蛋白表达框，所述四环素阻遏蛋白表达框包含第二启动子、四环素阻遏蛋白表达基因(SEQ ID 3)、内部核糖体进入位点(IRES)DNA序列(SEQ ID 4)和标记基因。