[发明专利]一种以山牛蒡为原料制备多糖皂甙的方法

摘要

本发明涉及一种多糖皂甙的制备方法，具体讲是涉及一种以山牛蒡为原料，通过生物转化、多糖皂甙浸提和膜过滤等步骤制备多糖皂甙的方法，其包括四个阶段，分别为：原料处理阶段、生物转化及提取阶段、分离阶段和色谱分离阶段；选择使用气流粉碎技术制成了山牛蒡超细微粉，确定了粉碎技术参数，微粉最小平均粒径可处理到小于0.2微米；山牛蒡多糖粗分离：利用超声波水提取法对多糖的提取做了初步研究，有效成份的提取率可以提高约10%，纯度达到65%以上；建立了适用于工业色谱分离山牛蒡皂甙类单体化合物的高效液相检测方法和薄层的检测方法，实现对产品进行批量制备。

主权项

一种以山牛蒡为原料制备多糖的方法，其包括四个阶段，分别为：原料处理阶段、生物转化及提取阶段、分离阶段和色谱分离阶段；所述原料处理阶段的过程为：1）将选好的山牛蒡用清水进行清洗；2）将清洗后的山牛蒡超微粉碎：利用行星球研磨机对山牛蒡进行粉碎，并采用气流粉碎技术；所述行星球研磨机转速为270~280r/min,研磨时间为80~90min,介质填充率为10~15%,被粉碎物料填充率为10~15%；所述生物转化及提取阶段采用酶对处理后的原料进行转化；采用超声波水提取；所述生物转化及提取阶段采用酶对处理后的原料进行转化；采用超声波水提取；所述超声波提取的条件为：料液比为1：15，时间为10~20min，温度为50~70℃、功率400~450W；所述分离阶段的过程为：1）、膜过滤，去除杂质；2）、选用大孔树脂在pH值为6~7，温度为30~40条件下进行柱上分离；所述色谱分离阶段其采用工业色谱进行分离，其以牛蒡苷、牛蒡苷元为测定指标，测定了提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量；色谱柱为KromasilC18100A(150mm×4.6mm,5μm)；流动相：甲醇‑水(采用梯度洗脱方式：0～7min，35%～45%甲醇；7～9min，45%～48%甲醇；9～15min，48%～53%甲醇；15～24min，53%～80%甲醇；24～30min，80%～100%甲醇)；检测波长为280nm，牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分别为97.7%、96.9%；RSD分别为1.3%、0.9%(n=5)。