[发明专利]一种利用植物组织培养技术生产百合鳞茎的方法

摘要

本发明提供一种利用植物组织培养技术生产百合鳞茎的方法，通过外植体制备、增殖培养、鳞茎形成三个生产步骤完成周期短、成本低、操作简单的百合鳞茎生产。其中，使用间歇浸没植物生物反应器进行增殖培养，在同一个植物生物反应器中完成增殖培养和鳞茎形成两个步骤，培养过程中无需对组培苗进行转移操作，避免了组培苗转移到一个新的环境而出现的调整期，缩短了生产周期。整个培养过程只需要一次接种，不需对组培苗进行转移操作而采用更换培养液，省去了频繁转接和大批量组培瓶的灌装清洗等操作，大大减少了劳动量，降低了生产成本。同传统的固体培养相比减少了继代次数，降低了变异率，且在无菌环境中培养，避免了病毒的交叉感染，鳞茎质量较好。

主权项

一种利用植物组织培养技术生产百合鳞茎的方法，其特征在于，包括以下生产步骤，外植体制备：将消毒后的百合鳞片切成大小为0.25~4.0cm2的小块，将所得百合鳞片的小块接种到固体培养基中，在配方为MS+0.1~0.5mg/L NAA+0.5~1.5mg/L 6‑BA+30%蔗糖的固体培养基中经过20~40d组织培养获得无菌的百合组培苗，作为植物生物反应器培养的外植体；增殖培养：使用间歇浸没植物生物反应器进行培养，设定间歇浸没培养系统的浸没频率为3~20 min/1~12h，将上一步骤所得外植体以10~90个外植体/L的接种密度接种到间歇浸没系统中，在间歇浸没植物生物反应器中倒入增殖培养液，在光照强度1500~1800 lux、光照时间14 h/d、培养温度25±3℃的培养条件进行增殖培养25~80d；鳞茎形成：增殖培养结束后，在与增殖培养使用的同一间歇浸没系统中更换为鳞茎诱导培养液，设定间歇浸没系统的浸没频率为1~10 min/1~12h后，在光照强度1500~1800 lux、光照10 h/d、温度22±2℃的培养条件下继续进行培养30~80d，形成百合鳞茎，完成百合鳞茎的培养。