[发明专利]一种磷酸化胶原蛋白的制备方法

摘要

本发明公开了一种磷酸化胶原蛋白的制备方法，其步骤包括：一、磷酸化；二、盐析；三、纯化；四、干燥；所得磷酸化胶原蛋白为白色粉末，其收得率≥87.5％，磷酸化程度15.2磷／mol。本发明比传统胶原蛋白具有更好的生理活性，能更好的促进人体对钙铁等的吸收和利用。

主权项

一种磷酸化胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤包括：一、磷酸化：称取定量水解胶原蛋白液，置于反应釜中，在搅拌下用蒸馏水稀释至蛋白质质量浓度为0.25％，用氢氧化钠溶液调节其pH值为8.0‑9.0，向反应釜夹层通入蒸汽，使稀释胶原蛋白液升温至70℃，在保温状态下加入三聚磷酸钠进行磷酸化反应，三聚磷酸钠用量为胶原蛋白质量的1/1 ，反应2.5h；二、盐析：完成反应后，向反应釜夹层通入冷却水，降温至8℃以下，泵入沉淀罐，然后，在搅拌下向反应釜中泵入饱和硫酸铵溶液盐析沉淀磷酸化胶原蛋白，直至盐析液中硫酸被饱和度达到85％时止；三、纯化：静置处理30min后离心，离心机转速为l3000r／min ，温度4℃，离心时间8min，弃上清液，沉淀物再次用饱和度为85％的硫酸铵溶液充分洗涤数次，冷冻离心，获得脱无机磷的磷酸化胶原蛋白沉淀，将脱无机磷的磷酸化胶原蛋白沉淀置于透析袋中，对pH值为8.5的碳酸钠溶液进行过夜透析脱盐，获得脱盐磷酸化胶原蛋白液；     四、干燥：将脱盐磷酸化胶原蛋白液进行冷冻干燥，获得磷酸化胶原蛋白冻干粉，冷冻干燥条件为温度‑50～‑45℃，真空度为80～100Pa，时间为12～16h。