[发明专利]乳糖代替IPTG诱导重组鸡α干扰素在大肠杆菌中的表达无效
| 申请号： | 201210528728.2 | 申请日： | 2012-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN102994596A | 公开（公告）日： | 2013-03-27 |
| 发明（设计）人： | 马仲彬;徐公豹;李炳志;李秋霞;申艳敏;王兴涛;王新娟 | 申请（专利权）人： | 河南省康星药业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 451464 河南省郑州市*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开一种乳糖代替IPTG作为诱导剂诱导pET28a载体生产重组鸡α干扰素的方法。对乳糖诱导的时机、乳糖浓度、诱导持续时间条件进行研究，确定了乳糖诱导的最佳条件。结果表明，乳糖能有效地诱导重组α干扰素表达的表达，并且目的蛋白的表达量高于IPTG的诱导量。生产成本降低10%左右，菌体量提高20%，同时乳糖不会对环境造成污染。 | ||
| 搜索关键词： | 乳糖 代替 iptg 诱导 重组 干扰素 大肠杆菌 中的 表达 | ||
【主权项】：
一种乳糖代替IPTG诱导重组鸡α干扰素在大肠杆菌中的表达，其特征在于包括如下步骤：（1）种子培养方法：从‑70℃冰箱中取出含鸡α干扰素重组质粒的甘油保藏管1支，于冰水浴中解冻，混匀后以1%接种量转接到50mlLB培养基中，在37℃的恒温摇床中振荡培养12h，转速为200r/min;（2）发酵和诱导：将经活化的种子液按1%的接种量接种于2L培养基中，37℃恒温摇床中振荡培养，转速为200r/min,当菌体浓度达到一定OD值时，添加诱导剂乳糖,分别调整诱导剂浓度、诱导时机、诱导培养时间因素进行发酵培养，以诱导后目的蛋白的浓度作为依据，确定最佳诱导方案。
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