[发明专利]电感耦合等离子体质谱在氯高铁血红素药物检测中的应用

摘要

本发明涉及电感耦合等离子体质谱在氯高铁血红素药物检测中的应用。测定动物血浆中稳定性同位素铁浓度的方法使用ICP-MS法进行测定，步骤：提供电感耦合等离子体质谱仪；确定ICP-MS的工作条件；提供稳定性同位素铁粉末、标记后的氯高铁血红素、内标元素等；配制标准溶液和内标溶液；ICP-MS稀释剂的配制；标准曲线的建立；血浆中同位素铁浓度测定：取含有铁的动物血浆样品样品管，加入ICP-MS稀释剂，混匀后置冰箱冷藏，进样测定，用所得标准曲线确定血浆中铁的浓度。本发明方法具有良好的性能，例如该方法具有良好的定量下限、精密度、绝对回收率试验、样品稳定性、介质效应和质量控制要求，可以作为分析生物样品例如血浆中稳定性同位素铁的含量测定方法。

主权项

测定动物(例如大鼠)血浆中稳定性同位素58Fe浓度的方法，该方法是使用ICP‑MS法进行测定，其包括以下步骤：(1)提供电感耦合等离子体质谱仪(其例如Thermo SCIENTIFIC的型呈为X SERIES2的ICP‑MS仪)；(2)确定ICP‑MS的工作条件；(3)提供稳定性同位素58Fe金属粉末、标记后的氯高铁血红素、内标元素(例如锗元素)、曲拉通等；(4)配制标准溶液和内标溶液(例如分别配制含58Fe浓度为2mg/mL的储备液，溶剂例如可以是1.7%~2.3%的硝酸；例如分别配制含锗浓度为1mg/mL的内标溶液，溶剂例如可以是1.7%~2.3%的硝酸，溶剂例如可以是2%的硝酸)；(5)ICP‑MS稀释剂的配制(在一个实施方案中，该ICP‑MS稀释剂中含有水、曲拉通、硝酸和丁醇。在一个实施方案中，该ICP‑MS稀释剂中曲拉通、硝酸和丁醇三者的重量比为1：4.5‑5.5：180‑220。例如该ICP‑MS稀释剂中曲拉通、硝酸和丁醇三者的重量比为1:5:200。例如按照1:5:200的比例，用去离子水配制ICP‑MS稀释剂，使得去离子水中曲拉通、硝酸和丁醇的比例分别0.01%、0.05%和2%)；(6)标准曲线的建立：取Eppendorf管9个，加入58Fe对照品溶液50μL，于37°C恒温水浴挥干后，分别加入大鼠空白血浆50μL，混匀后加入所配制的ICP‑MS稀释剂，使得58Fe在血浆中的浓度分别为0、5、10、20、50、100、200、800、1000ng/mL，涡旋混合30秒，借助三通装置，进行在线加入内标(锗，50ng/mL)，进样测定，以校正后的响应值ICPS为纵坐标，浓度C(ng/mL)为横坐标，进行回归，得58Fe的标准曲线；(7)血浆中58Fe的浓度测定：取含有58Fe(例如服用含58Fe的物质)的动物(例如大鼠)血浆样品50μL至Eppendorf管，加入ICP‑MS稀释剂950μL，混匀后置冰箱(4°C)冷藏，进样测定，用步骤(6)所得标准曲线确定血浆中58Fe的浓度。进一步地，其中所述ICP‑MS的工作条件为：离子源为ICP源，采用石英玻璃同心雾化器(0.8mL/m)，整体型石英炬管，1.5mm口径喷射；雾化器氩气的流量为0.6～0.8L/min；检测模式为CCT模式(使用含7%(v/v)H2的He作为碰撞气)；检测器模拟级电压为1880v，检测器脉冲级电压为3812v，射频功率为1300w，冷却气流量为11.0~15.0L/min，样品提升量为1mL/min，样品提升时间为40s，重复次数为3次，分别选择铁Fe(54，58)，镍Ni(58)，铬Cr(53)，锗Ge(72)为扫描元素，扫描方式为跳峰扫描。