[发明专利]一种从虎杖中制备高纯度白藜芦醇的方法

摘要

本发明涉及一种从虎杖中制备高纯度白藜芦醇的方法，其特征在于包括如下操作步骤：a）白藜芦醇的粗提：以虎杖为原料，用有机溶剂进行提取；b）酶解：将浓缩液加水进行分散后加入复合酶进行酶解；c）萃取：将上述的酶解液用溶剂进行萃取；d）硅胶柱层析纯化白藜芦醇：用洗脱剂进行等梯度洗脱；e）中压C18键合硅胶ODS柱层析纯化：甲醇:水为洗脱剂进行等梯度洗脱；f）将上述的低纯度白藜芦醇样品IV用溶剂重结晶纯化。白藜芦醇产品纯度达98%以上，达到药用标准。本工艺提取率高、生产周期短、产品纯度高、收率高以及生产成本低，工艺操作简单易行。

主权项

一种从虎杖中制备高纯度白藜芦醇的方法，其特征在于包括以下步骤：a.白藜芦醇的粗提：以虎杖为原料，用有机溶剂回流搅拌提取，过滤，残渣按上述步骤再提取两遍，过滤，收集滤液，合并3次滤液；滤渣用挤干机挤干，收集液体，残渣用蒸渣机回收残留的溶剂；合并提取液，提取液真空浓缩至无有机溶剂，待酶解；b.酶解：将浓缩液加水进行分散，调节pH=4‑5，然后加入一定量由β‑葡萄糖苷酶、纤维素酶和β‑葡聚糖苷酶按一定比例配制的复合酶，搅拌，在一定的温度下酶解时间为12‑24 h；HPLC检测酶解液中的虎杖苷直至检测不出虎杖苷，酶解完成后酶解液待萃取；c.萃取：将上述的酶解液用乙酸乙酯、氯仿、石油醚、乙醚中的一种或者几种混合溶剂进行萃取；在萃取过程中会出现不同程度的乳化现象，将乳化层分离出来后用超声波设备进行破乳处理，收集萃取相，合并萃取相；将萃取相真空浓缩，回收溶剂，得白藜芦醇样品I，待用硅胶柱层析纯化；d.硅胶柱层析纯化白藜芦醇：称取一定量的层析硅胶并进行活化，然后湿法装入不锈钢层析柱中，并用流动相平衡层析柱；将上述的白藜芦醇样品Ⅰ用流动相溶解后湿法上样；然后用石油醚、乙酸乙酯、甲醇混合液为洗脱剂进行等梯度洗脱；分步收集流出液，TLC检测流出液，合并含有白藜芦醇成份的流出液，回收溶剂，干燥得白藜芦醇样品II；白藜芦醇样品II待用中压C18键合硅胶ODS柱层析纯化；e.中压C18键合硅胶ODS柱层析纯化：将C18键合硅胶湿法装入动态轴向不锈钢中压层析柱，用加压装置进行压缩，并用流动相平衡层析柱；将上述的白藜芦醇样品II用流动相进行溶解，湿法上样；以甲醇水混合液为洗脱剂进行等梯度洗脱，紫外检测器在线监测，分步收集色谱峰对应流出液，HPLC检测流出液，合并具有相同成份的流出液，回收溶剂，干燥得高纯度白藜芦醇样品III和低纯度白藜芦醇样品IV；经HPLC检测，白藜芦醇样品III纯度达98%以上；f.将上述的低纯度白藜芦醇样品IV用甲醇、乙醇、丙酮一种或几种混合溶剂的水溶液重结晶纯化；晶体经过HPLC检测，白藜芦醇纯度达98%以上。