[发明专利]一种罗非鱼源无乳链球菌的高灵敏度快速检测方法无效
| 申请号： | 201210368104.9 | 申请日： | 2012-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN102888458A | 公开（公告）日： | 2013-01-23 |
| 发明（设计）人： | 易弋;杨军;黄稀;黎娅;伍时华;罗福广;左跃 | 申请（专利权）人： | 广西工学院;柳州市鱼家乐饲料有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/14 |
| 代理公司： | 柳州市荣久专利商标事务所(普通合伙) 45113 | 代理人： | 周小芹 |
| 地址： | 545006 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 一种罗非鱼源无乳链球菌的高灵敏度快速检测方法，涉及一种无乳链球菌的检测方法，本发明以无乳链球菌cfb基因为检测对象，通过检测罗非鱼血液中是否存在无乳链球菌cfb基因，从而判断被检罗非鱼是否受到了无乳链球菌感染。本方法通过反转录的方法将菌体内单拷贝的cfb基因转变为多拷贝，再通过环介导等温扩增技术对目标基因进行检测，从而大大提高检测灵敏度。该方法能在感染初期快速、特异、简便的检出罗非鱼体内的无乳链球菌，为罗非鱼链球菌病的预防提供新的技术手段。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 罗非鱼 源无乳 链球菌 灵敏度 快速 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种罗非鱼源无乳链球菌的高灵敏度快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：S1.抽取待检罗非鱼的血液1~2 mL，提取血液中的总RNA；S2.以所提取的总RNA为模板，进行反转录反应，获得待测罗非鱼血液样品的cDNA；S3.根据无乳链球菌的cfb基因序列设计并合成用于环介导等温扩增的引物；S4.以上述步骤S2中获得的cDNA为模板，利用上述步骤S3中合成的引物，进行目标基因的环介导等温扩增；S5.扩增完成后，检测反应结果，结果阳性的表示供检罗非鱼感染了无乳链球菌，结果阴性的表示供检罗非鱼没有感染无乳链球菌。
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