[发明专利]高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法、相关CIK细胞及应用有效
| 申请号： | 201210324368.4 | 申请日： | 2012-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN102827809A | 公开（公告）日： | 2012-12-19 |
| 发明（设计）人： | 凌丹彦;戴书缙 | 申请（专利权）人： | 上海易美生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N5/0786;A61K35/14;A61P35/00;A61P31/00;A61P37/02 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 王洁;郑暄 |
| 地址： | 200032 上海市徐汇*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法，包括以下步骤：（1）将外周血单个核细胞分选去除CD4+CD25+Treg细胞，得到CIK前期细胞；（2）将CIK前期细胞置于含有100ng/ml PHA、100ng/ml IL-6、10ng/ml PGE2的细胞培养液中培养24小时；（3）转移至经1ug/ml CD3单抗包被的细胞培养瓶中，加入1000U/ml IFN-γ培养48小时；（4）加入1000U/ml IL-2以及100ng/ml IL-1α培养4天；（5）加入1ug/ml胰岛素继续培养7-14天。还提供了相关的CIK细胞及应用、抑制外周血单个核细胞向CD4+CD25+Treg细胞分化的方法及促进CIK细胞增殖的方法。本发明的CIK细胞制备方法设计巧妙，制备得到的肿瘤杀伤细胞-CIK细胞具有较强的增殖能力，较高的毒活性，具有更佳的肿瘤杀伤效率，提高临床疗效，适于大规模推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 增殖 能力 细胞 活性 存活率 cik 制备 方法 相关 应用 | ||
【主权项】：
一种高增殖能力、高细胞毒活性、高存活率的CIK细胞制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将外周血单个核细胞分选去除CD4+CD25+Treg细胞，得到CIK前期细胞；（2）将CIK前期细胞置于含有100ng/ml PHA、100ng/ml IL‑6、10ng/ml PGE2的细胞培养液中培养24小时；（3）转移至经1ug/ml CD3单抗包被的细胞培养瓶中，加入1000U/ml IFN‑γ培养48小时；（4）加入1000U/ml IL‑2以及100ng/ml IL‑1α培养4天；（5）加入1ug/ml胰岛素继续培养7‑14天。
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