[发明专利]草鱼肿瘤坏死因子alpha的竞争抑制酶联免疫检测方法有效
| 申请号： | 201210312755.6 | 申请日： | 2012-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN102998457A | 公开（公告）日： | 2013-03-27 |
| 发明（设计）人： | 周红;陈丹燕;张安英 | 申请（专利权）人： | 电子科技大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/543 |
| 代理公司： | 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 51220 | 代理人： | 温利平 |
| 地址： | 611731 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明涉及草鱼肿瘤坏死因子alpha的竞争抑制酶联免疫检测方法，包括如下步骤：步骤1：确定包被抗原的浓度和多克隆抗体的最适稀释倍数；步骤2：建立竞争抑制酶联免疫检测方法，包被草鱼肿瘤坏死因子alpha蛋白的酶标板得到固定于酶标板上的抗原；将酶标抗体与抗原混合液混合后与固定于酶标板上的抗原竞争结合；洗涤酶标板以及对底物显色；对酶标板的孔进行读数得到每个孔的吸光值，根据读取的吸光值分别计算标准品抗原和待测样品的抑制率从而根据该抑制率计算待测样品的浓度。本发明的有益效果是：为检测草鱼中肿瘤坏死因子alpha的蛋白表达水平提供了快速高效的检测手段，该法稳定可靠，且成本较低。 | ||
| 搜索关键词： | 草鱼 肿瘤 坏死 因子 alpha 竞争 抑制 免疫 检测 方法 | ||
【主权项】：
草鱼肿瘤坏死因子alpha的竞争抑制酶联免疫检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：确定包被抗原的浓度和多克隆抗体的最适稀释倍数；步骤2：建立竞争抑制酶联免疫检测方法，具体过程包括如下步骤：步骤21：包被草鱼肿瘤坏死因子alpha蛋白的酶标板得到固定于酶标板上的抗原；步骤22：封闭去除酶标板上没有包被上草鱼肿瘤坏死因子alpha蛋白的部位；步骤23：制备酶标抗体与抗原混合液；步骤24：将酶标抗体与抗原混合液混合后与固定于酶标板上的抗原竞争结合；步骤25：洗涤酶标板以及对底物显色；步骤26：对酶标板的孔进行读数得到每个孔的吸光值（OD），根据读取的吸光值分别计算标准品抗原和待测样品的抑制率从而根据该抑制率计算待测样品的浓度。
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