[发明专利]一种1,3-丙二醇的制备方法有效
| 申请号： | 201210262830.2 | 申请日： | 2012-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN102776245A | 公开（公告）日： | 2012-11-14 |
| 发明（设计）人： | 方柏山;池帅 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12P7/18 | 分类号： | C12P7/18;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人： | 马应森 |
| 地址： | 361005 *** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 一种1,3-丙二醇的制备方法，涉及一种化工原料。构建生物砖元件dhaT，再构建生物砖元件T7 promoter-RBS-dhaT-TT，然后构建组基因环路装置T7-RBS1.0-dhaB-TT-T7-RBS1.0-yqhD-TT-T7-RBS1.0-dhaT-TT，再发酵培养。利用合成生物学技术快速、高效构建甘油转化1,3-丙二醇的基因环路装置库，并可广泛应用于合成生物学中标准模块和元件的组合与拼装。此外，基因环路解决了NADH单一还原力瓶颈问题，达到NADH和NADPH辅酶并用的效果，优化甘油转化为1,3-丙二醇的合成生物系统，提高1,3-丙二醇产量和得率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 丙二醇 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种1,3‑丙二醇的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）将1,3‑丙二醇氧化还原酶基因dhaT从克雷伯杆菌DSM2026中克隆出来，通过PCR方法加上生物砖标准化酶切位点EcoRI，XbaI，SpeI并与生物砖骨架pSB1A2连接，进行同义突变，完成生物砖元件dhaT的构建；2）测序完成后分别与RBS1.0，RBS0.6，RBS0.3，RBS0.07连接，再连接上T7 promoter，TT terminater，构建成不同表达效率的蛋白酶表达元件，甘油保种，‑70℃保存，来源于丁酸梭状芽孢杆菌VPI 1718的甘油脱水酶基因dhaB及来源于大肠杆菌的1,3‑丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD按步骤1）构建；3）将构建好的dhaB，dhaT，yqhD连接成基因环路，转化到大肠杆菌BL21中，甘油保种；4）进行发酵培养前先在种子培养基中培养，用无菌注射器将种子液第1次接种于装有种子培养基的血清瓶中再培养，将扩培的种子液第2次接种于装有发酵培养基的发酵罐中发酵后，得产物1,3‑丙二醇。
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