[发明专利]调节核酸的甲基化/去甲基化状态的方法和试剂有效
| 申请号： | 201210256035.2 | 申请日： | 2012-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN102888395A | 公开（公告）日： | 2013-01-23 |
| 发明（设计）人： | 徐国良 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/34;C12Q1/26 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及调节核酸的甲基化/去甲基化状态的方法和试剂。本发明人首次证实，基因组DNA中的5-甲基胞嘧啶(5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)都可以被Tet双加氧酶氧化为5-羧基胞嘧啶(5caC)。胸腺嘧啶DNA糖基化酶(TDG)可以特异性地识别该5caC，并将其从基因组中切除，引起DNA主动去甲基化。因此，可基于此来调节基因组中DNA的甲基化/去甲基化作用，以及制备调节基因组中DNA的甲基化/去甲基化作用的试剂。本发明确证了细胞中基因组DNA存在5caC修饰，5caC修饰谱式可用来监测细胞状态，并发现ATP及其类似物可以作为Tet酶的调节剂。并且，白血病中Tet突变使5caC活性降低或丧失。 | ||
| 搜索关键词： | 调节 核酸 甲基化 状态 方法 试剂 | ||
【主权项】：
一种DNA去甲基化的方法，包括：(1)以Tet双加氧酶处理DNA，将DNA中5‑甲基胞嘧啶或5‑羟甲基胞嘧啶转变为5‑羧基胞嘧啶；(2)以胸腺嘧啶DNA糖基化酶处理步骤(1)获得的DNA，将DNA中5‑羧基胞嘧啶切除。(3)通过DNA剪切修复途径，在5‑羧基胞嘧啶切除位点加上非甲基化的胞嘧啶。
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