[发明专利]转基因油菜标准样品、其建立方法及应用

摘要

本发明公开一种转基因油菜RT73的标准样品制备、其建立方法及其在检测转基因油菜RT73中的应用，分别以转基因油菜RT73或非转基因油菜为原料，将原料研磨、过筛、加水，搅拌、静置、将沉淀物制备成冻干粉；再将二者以科学的比例混合，并重复“加水，搅拌、静置、将沉淀物制备成冻干粉”的过程，分装,0℃~4℃贮存；通过上述方法获得转基因油菜RT73的标准样品，也可以应用于转基因油菜RT73的Real-Time PCR检测试剂盒。这对全面深入的研究解决转基因成分检测标准样品的制备技术和稳定性保证技术，积极开展我国转基因产品检测标准样品的研制，添补该测量领域的空白，具有很重要的现实意义。

主权项

转基因油菜RT73标准样品，其特征在于，通过下述方法制备：a取油菜籽原料放在研钵中，于通风橱内加入乙醚并用研棒搅拌、研磨，待乙醚蒸发后，将其过100目标准筛，收集粉末备用；b向步骤a所获得的粉末中加入等质量的水，搅拌均匀后，静置1h，弃上清，将沉淀物制备成冻干粉；c以转基因油菜RT73为原料，按照步骤a和b所述方法制备冻干粉；d以非转基因油菜籽为原料，按照步骤a和b所述方法制备冻干粉；e将步骤c制备的冻干粉与步骤d制备的冻干粉按2.5：100的重量比例混合后，向混合粉末中加入等质量的水，搅拌均匀后，静置1h，弃上清，将沉淀物制备成冻干粉并分装,0~4℃贮存；上述步骤b~e中任一步骤所述的冻干粉，其制备方法为：①样品预冻：先把样品在‑80℃冷冻2h；②冷冻过程：关好冰冻干燥机的干燥室门，开始干燥室制冷；干燥室温度降至‑35℃时，开始冷却阱制冷；冷却阱制冷温度降至‑40℃时，将步骤①处理的样品迅速放入干燥室内，关好干燥室门；启动真空泵开始抽真空；当真空度降至0.5Torr时，结束冷冻过程；③样品干燥：干燥室的温度设置为15℃,当真空度降至0.1Torr时，样品已干燥好；④关闭真空泵，使干燥室与外界大气相通，待内外气压平衡后，打开干燥室门，取出样品，迅速旋紧瓶盖。