[发明专利]八角基因组DNA的提取方法

摘要

本发明提供一种八角基因组DNA的提取方法，在八角粉末中加入CTAB提取液，混匀，离心后得到上清液A；在上清液A中加入等体积的氯仿︰异戊醇溶液，混匀，离心，再在所得上清液中加入等体积的氯仿︰异戊醇溶液，混匀、静置、离心分离得上清液B；在B中加入-30℃的无水乙醇后，离心得沉淀物；采用常规试剂盒所用的吸附柱再次纯化沉淀物，经洗脱、静置、离心后，将所得的洗脱液再次返回到吸附柱中，离心得到的液体即为八角基因组DNA溶液。本发明综合了CTAB法和试剂盒提取方法的特点，最终得到顽拗类植物八角高质量的基因组DNA。

主权项

一种八角基因组DNA的提取方法，其特征在于经过下列各步骤：（1）按每100 g八角粉末加入6～8 L提取液的量，在八角粉末中加入预热55～65 ℃的CTAB提取液，混匀，在55～65 ℃下保温30～60分钟，其间晃动3～4次，使其充分混合，得混合物；（2）将步骤（1）的混合物在转速为8000～12000 rpm下，离心5～10分钟，得到上清液A；（3）在步骤（2）所得上清液A中加入等体积的氯仿与异戊醇溶液，其中，氯仿︰异戊醇的体积比为24︰1，混匀后在室温下静置5～10分钟，再在8000～12000 rpm下离心分离5～10分钟，取出上清液；在上清液中再次加入等体积的体积比为24︰1的氯仿与异戊醇溶液，混匀后室温静置5～10分钟，离心分离，得到上清液B；（4）按上清液B体积的2～3倍的量，在上清液B中加入‑30 ℃的无水乙醇，产生絮状沉淀，离心得沉淀物；（5）采用植物DNA提取试剂盒的吸附柱将步骤（4）所得沉淀物，按试剂盒操作程序进行漂洗、室温静置、离心洗脱，得洗脱液；（6）将步骤（5）所得的洗脱液返回到吸附柱中，室温下静置5～10分钟，再在8000～12000 rpm下离心2分钟，所得的液体即为八角基因组DNA溶液。