[发明专利]含F/2A序列的抗p185erbB2人鼠嵌合抗体慢病毒表达载体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种含F/2A序列的抗p185erbB2人鼠嵌合抗体慢病毒表达载体及其构建方法，用具有自我剪切能力的弗林蛋白酶(Furin)/口蹄疫病毒2A多肽(F/2A)连接人鼠嵌合抗体的重链和轻链，形成一个开放阅读框(ORF)，插入慢病毒表达载体pWPI，构建重组抗p185erbB2全长人鼠嵌合抗体表达载体pWPI/H-F2A-L。经测序鉴定，pWPI/H-F2A-L与预期设计一致。重组慢病毒的感染效率分别为87.68％，感染293T细胞后，有嵌合重链和嵌合轻链的表达。与含IRES的嵌合抗体慢病毒表达载体进行比较，由F/2A介导的嵌合抗体的表达水平要高于由IRES介导的嵌合抗体，为今后抗p185erbB2工程抗体的研究奠定了基础。

主权项

一种含F/2A序列的抗p185erbB2人鼠嵌合抗体慢病毒表达载体，其特征在于该载体是pWPI/H‑F2A‑L，其中H和L分别是抗p185erbB2人鼠嵌合抗体重链基因和抗p185erbB2人鼠嵌合抗体轻链基因，F2A是弗林蛋白酶和口蹄疫病毒2A自剪切多肽。