[发明专利]一种利用外切核酸酶活性的无痕克隆及重组方法无效
| 申请号： | 201210070600.6 | 申请日： | 2012-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN102604982A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 戴忠敏;孙淑慧;黄浩;邱猛生 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;冷红梅 |
| 地址： | 310036 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用外切核酸酶活性的无痕克隆及重组方法，所述方法是在目的基因两端分别加上与克隆载体插入位点两端序列相同的长度为10～30bp的DNA片段后与载体DNA在外切核酸酶作用下进行重组，即在制备目的基因片段时，在扩增引物的5’端分别加上与克隆载体插入位点两端序列相同的长度为10～30bp的DNA片段。本发明的有益效果主要体现在：(1)目的基因或DNA片段不需要酶切，不必考虑其内部的酶切位点，也不受载体上限制性内切酶识别位点的限制；(2)目的片段连接到载体时避免了引入不必要的序列，即无痕克隆。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 外切 核酸酶 活性 克隆 重组 方法 | ||
【主权项】：
一种利用外切核酸酶活性的无痕克隆及重组方法，其特征在于所述方法是在目的基因两端分别加上与克隆载体插入位点两端序列相同的长度为10～30bp的DNA片段后与载体DNA在外切核酸酶活性作用下进行重组，即在制备目的基因片段时，在扩增引物的5’端分别加上与克隆载体插入位点两端序列相同的长度为10～30bp的DNA片段。
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