[发明专利]五位醛基脱氧尿苷的荧光检测方法有效
申请号: | 201210044877.1 | 申请日: | 2012-02-27 |
公开(公告)号: | CN102621114A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 周翔;郭璞;翁小成 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 汪俊锋 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及一种检测脱氧胸苷氧化突变成五位醛基脱氧尿苷的化学方法:将4-甲氧基邻苯二胺或邻苯二胺作为检测试剂,二硫苏糖醇作为抗氧化剂,并溶解于10mM的pH=4.5的醋酸缓冲液中作为检测试样;检测试样在有氧的室温条件下反应3小时后,用荧光光度分析仪检测空白试样和检测试样,发现:4-甲氧基邻苯二胺作为检测试剂时,峰值发生位移至475nm,或邻苯二胺作为检测试剂时,峰值发生位移至430nm。本发明用简单易得的4-甲氧基邻苯二胺和邻苯二胺与5-醛基脱氧尿苷在醋酸缓冲液中生成可发出荧光的化合物,从而荧光检测出脱氧胸苷氧化突变的存在。 | ||
搜索关键词: | 五位醛基 脱氧 荧光 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种检测五位醛基脱氧尿苷的方法,其特征在于:将4‑甲氧基邻苯二胺或邻苯二胺作为检测试剂,二硫苏糖醇作为抗氧化剂,按检测试剂:待测化合物为1:5、检测试剂:抗氧化剂为1:1的摩尔比例配比,并溶解于10mM的pH=4.5的醋酸缓冲液中作为检测试样,同时制备不含待测化合物的空白试样;检测试样在有氧的室温条件下反应3小时后,用荧光光度分析仪检测空白试样和检测试样,发现:4‑甲氧基邻苯二胺作为检测试剂时,峰值发生位移至475nm,或邻苯二胺作为检测试剂时,峰值发生位移至430nm。
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