[发明专利]一种用于制备转基因小鼠的精子处理方法无效
申请号: | 201210026458.5 | 申请日: | 2012-02-07 |
公开(公告)号: | CN103243076A | 公开(公告)日: | 2013-08-14 |
发明(设计)人: | 朱孝荣;袁红华;彭长凌 | 申请(专利权)人: | 朱孝荣;徐州医学院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/63;C12N15/66 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛 |
地址: | 221002 江苏省徐州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明属于转基因领域,涉及一种用于制备转基因小鼠的精子处理方法。一种用于制备转基因小鼠的精子处理方法,将小鼠附睾精子于5%CO2培养箱37℃孵育8~10分钟,然后将含有目的基因的线性DNA片段与精子混合,2℃~5℃冰浴25~30分钟,40~45℃热休克1~3分钟,2℃~5℃冰浴3~5分钟,5%CO2培养箱37℃孵育50~70分钟获能。该方法能够提高精子膜的通透性,便于基因片段进入精子内部,提高转基因效率。解决了以精子为载体制备转基因小鼠效率低、稳定性差、传代困难的问题。将为转基因小鼠制备提供一种有效的方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 制备 转基因 小鼠 精子 处理 方法 | ||
【主权项】:
一种用于制备转基因小鼠的精子处理方法,其特征在于将小鼠附睾精子于5%CO2培养箱37℃孵育8~10分钟,然后将含有目的基因的线性DNA片段与精子混合,2℃~5℃冰浴25~30分钟,40~45℃热休克1~3分钟,2℃~5℃冰浴3~5分钟,5%CO2培养箱37℃孵育50~70分钟获能。
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