[发明专利]转DXR基因提高青蒿中青蒿素含量的方法无效

专利信息
申请号: 201210013506.7 申请日: 2012-01-17
公开(公告)号: CN102604987A 公开(公告)日: 2012-07-25
发明(设计)人: 唐克轩;王玥月;陈韵斐;吴韶龑;王涛;沈乾 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N15/84 分类号: C12N15/84;A01H5/00
代理公司: 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 代理人: 郭国中
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明是一种生物技术领域的转DXR基因提高青蒿中青蒿素含量的方法。本发明从青蒿中克隆1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶DXR的基因,构建含DXR基因的植物表达载体,用根癌农杆菌介导,将DXR基因转入青蒿并再生出植株,PCR检测外源目的基因DXR的整合情况,高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定(HPLC-ELSD)转基因青蒿中青蒿素的含量,筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明获得的转基因青蒿中青蒿素的含量显著提高,最高达到非转化对照植株的2.4倍,从而提供了一种提高青蒿中青蒿素含量的方法,为利用转基因青蒿大规模生产青蒿素打下了基础。
搜索关键词: dxr 基因 提高 青蒿 青蒿素 含量 方法
【主权项】:
一种转DXR基因提高青蒿中青蒿素含量的方法,其特征是,该方法包括如下步骤:(1)采用基因克隆方法获得青蒿关键酶基因DXR;(2)把所述DXR基因连结于表达调控序列,构建含DXR基因的植物表达载体;(3)将所述含DXR基因的植物表达载体转化根癌农杆菌,获得含所述DXR基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株;(4)利用所述含DXR基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株转化青蒿,获得经PCR检测的整合DXR基因的转基因青蒿植株;(5)对所述转基因青蒿中青蒿素含量进行HPLC‑ELSD测定,筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。
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